A seleção do modo cromatográfico para purificação de proteí...

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Ano: 2025 Banca: FACET Concursos Órgão: Prefeitura de Monteiro - PB Prova: FACET Concursos - 2025 - Prefeitura de Monteiro - PB - Bioquímico Plantonista |

Q3757341 Técnicas em Laboratório

A seleção do modo cromatográfico para purificação de proteínas e metabólitos exige compatibilizar propriedade dominante do analito e mecanismo de retenção do leito, considerando pH efetivo, força iônica, polaridade e raio hidrodinâmico. À luz de Snyder, Kirkland & Dolan (2010) e Ladisch (2001), qual assertiva está correta sem ressalvas?

Afinidade baseia-se em adsorção inespecífica ao leito, viabilizando captura universal por interações de van der Waals, independentemente de ligantes de reconhecimento.

Exclusão por tamanho (SEC) promove ordenação por coeficiente de partição dependente de polaridade, eluindo pequenas primeiro por maior interação hidrofóbica intraporos do suporte.

Troca iônica separa por carga líquida efetiva, modulada por pH próximo ao pI e por força iônica do eluente, permitindo eluição por saltos de sal ou gradientes de pH controlados.

Fase reversa (C18) é preferível para proteínas nativas, pois preserva atividade enzimática sob eluição com solventes orgânicos, mantendo dobramento e função catalítica.

Cromatografia gasosa permite análise direta de proteínas intactas sem derivatização, por volatilização sob temperaturas moderadas e colunas apolares clássicas.

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