A alternativa correta é a E.

Tema Central: A questão aborda a clonagem de DNA, um procedimento de biotecnologia essencial para a engenharia genética. A clonagem do DNA envolve várias etapas cruciais que permitem a manipulação e multiplicação de fragmentos específicos de DNA em um organismo hospedeiro.

Resumo Teórico: A clonagem de DNA recombinante é um processo utilizado para isolar e amplificar uma sequência específica de DNA. O procedimento básico inclui a preparação de um vetor (como um plasmídeo), a inserção de um fragmento de DNA no vetor, a introdução desse vetor em uma célula hospedeira (geralmente uma bactéria) e, por fim, a seleção dos clones que contêm o DNA recombinante desejado.

Justificativa da Alternativa Correta (E): Essa opção descreve precisamente as etapas envolvidas na clonagem de DNA recombinante:

• Preparação do vetor e do inserto: O vetor é um DNA que pode replicar dentro de uma célula. O inserto é o fragmento de DNA que queremos clonar.
• Ligação do vetor/inserto: O inserto é ligado ao vetor utilizando enzimas como a DNA ligase.
• Transformação em célula hospedeira: O vetor recombinante é introduzido em células hospedeiras competentes.
• Seleção de clones: Somente as células que incorporaram o vetor recombinante são selecionadas para propagação.

Análise das Alternativas Incorretas:

A - Apesar de envolver extração de DNA e digestão enzimática, a etapa de blotting não faz parte do processo de clonagem de DNA.

B - Inclui a digestão enzimática, mas segue com biblioteca, hibridação e sequenciamento, que são etapas adicionais não básicas para formação de DNA recombinante.

C - Refere-se a etapas associadas à transformação e multiplicação bacteriana, porém não contempla a preparação do vetor e inserto, essenciais para a clonagem.

D - Menciona digestão enzimática e multiplicação bacteriana, mas omite a ligação do vetor/inserto e seleção de clones, que são etapas cruciais.

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