A separação por fase reversa depende das interações hidrofób...
Em um laboratório de pesquisa, foi isolado de hemolinfa de insetos um novo peptídio antifúngico de massa molecular 3 kDa e pI igual a 8. Considerando tais características e os diferentes métodos cromatográficos atualmente disponíveis para a purificação de proteínas e peptídios, julgue os itens a seguir.
A separação por fase reversa depende das interações hidrofóbicas entre o soluto dissolvido na fase móvel e o ligante imobilizado na matriz (a fase estacionária).
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Vamos analisar a questão sobre a técnica de cromatografia de fase reversa e como ela se aplica à purificação de um peptídio antifúngico isolado de hemolinfa de insetos.
Alternativa correta: C - certo
A cromatografia de fase reversa é uma técnica amplamente utilizada para a separação de proteínas e peptídeos com base em suas propriedades hidrofóbicas. Nesta técnica, a fase estacionária é composta por uma matriz de partículas hidrofóbicas, e a fase móvel é uma solução aquosa que contém o soluto que se deseja separar.
Durante o processo de separação, as moléculas hidrofóbicas do soluto interagem com a fase estacionária por meio de interações hidrofóbicas. Ou seja, as moléculas mais hidrofóbicas têm uma afinidade maior pela fase estacionária e, portanto, se movem mais lentamente através da coluna. Já as moléculas menos hidrofóbicas passam mais rapidamente pela coluna.
No enunciado da questão, temos um peptídio antifúngico com massa molecular de 3 kDa e ponto isoelétrico (pI) igual a 8. A alternativa correta indica que a separação por fase reversa depende das interações hidrofóbicas, o que está absolutamente correto, pois essa é a base fundamental da cromatografia de fase reversa.
Por que as alternativas incorretas estariam erradas?
Se houvesse outras alternativas sugerindo que a técnica depende majoritariamente de outras forças, como interações iônicas ou tamanho molecular, elas estariam incorretas para a fase reversa. Cada técnica cromatográfica tem sua especificidade: a cromatografia de troca iônica, por exemplo, depende das cargas elétricas das moléculas, enquanto a cromatografia de exclusão por tamanho separa as moléculas com base em seu tamanho.
No contexto da pergunta, fica claro que a abordagem correta é aquela que foca nas interações hidrofóbicas, como descrito na opção C.
Resumo:
A cromatografia de fase reversa é uma técnica que separa moléculas com base em suas interações hidrofóbicas. No caso do peptídio antifúngico descrito, a escolha da fase reversa é adequada, pois permite a separação eficiente com base na hidrofobicidade do peptídio.
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