A deficiência de gonadotrofinas é diagnosticada:

Pela medida dos valores séricos basais de hormônio luteinizante (LH), hormônio folículo-estimulante (FSH) e concomitantes esteroides gonadais testosterona livre em homens e estradiol em mulheres. Uma concentração baixa de testosterona livre ou estradiol em associação com níveis inapropriadamente baixos de gonadotrofinas é sugestiva de disfunção hipotálamo-hipofisária.

Pelo nível baixo ou inapropriadamente normal de TSH associado com baixo nível sérico de tiroxina (T4) livre sugere deficiência de TSH.

Quando a poliúria excedendo 2L/dia diminui a depuração de água livre pelos glomérulos, aumentando função da hipófise anterior para repor corticosteroides, apresentando concentração de urina.

Quando os níveis de rastreamento de cortisol e ACTH são baixos, indicando prontamente o uso do teste de hipoglicemia induzida por insulina. Em situações de reserva normal de ACTH, o cortisol sérico aumenta acima de 20 mg/dL. Além disso, um nível baixo aleatório de cortisol na presença de resposta normal a ACTH exógeno indica deficiência de ACTH.