Considerando reações de imunohistoquímica, é correto afirmar...
Gabarito comentado
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A questão aborda o tema das reações de imunohistoquímica, uma técnica essencial em laboratório para a identificação de proteínas específicas em tecidos, utilizando anticorpos marcados para visualizar a presença e localização de antígenos.
Vamos analisar cada alternativa:
Alternativa A: "Por serem proteínas purificadas, os anticorpos podem ser armazenados a –20ºC, pois são menos atingidos por sucessivos ciclos de congelamento e degelo."
Os anticorpos, embora sejam proteínas, são sensíveis a ciclos de congelamento e degelo repetidos, o que pode levar à sua desnaturação e perda de atividade. Portanto, para evitar a degradação, é recomendado armazená-los em alíquotas pequenas para minimizar a exposição a esses ciclos.
Alternativa B: "Quando se usa anticorpos conjugados à peroxidase, algumas células podem marcar inespecificamente devido ao alto grau de peroxidade endógena, como por exemplo mastócitos."
Esta afirmação está correta. A peroxidase endógena presente em algumas células, como mastócitos, pode causar uma marcação inespecífica. Para contornar isso, é comum a utilização de um bloqueio de peroxidase antes da incubação com anticorpos conjugados.
Alternativa C: "No processo de desparafinização e re-hidratação, as soluções podem ser sempre reutilizadas, uma vez que não são etapas críticas para a qualidade da reação."
O processo de desparafinização e re-hidratação é crítico na preparação de amostras para imunohistoquímica. Reutilizar soluções pode comprometer a remoção de parafina, afetando a penetração dos anticorpos e a qualidade da coloração.
Alternativa D: "Após re-hidratar os cortes de parafina, deve-se secar o corte histológico de modo a garantir que este esteja bem aderido à lâmina de vidro antes dos procedimentos e das incubações longas com anticorpos."
Secar completamente os cortes após a re-hidratação pode prejudicar a eficácia da reação, pois o tecido deve permanecer hidratado para garantir a penetração adequada dos anticorpos.
Alternativa E: "Se o tecido foi fervido para recuperação antigênica, não há necessidade de inativar a peroxidase endógena."
A recuperação antigênica não substitui o bloqueio da peroxidase endógena. Este bloqueio é necessário para evitar marcações inespecíficas, mesmo após a recuperação antigênica.
Com base nisso, a alternativa correta é a B, que aborda a questão do marcador enzimático e a possível reação inespecífica devido à presença de peroxidase endógena.
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