A técnica de reação em cadeia da polimerase
(PCR) é amplamente utilizada em estudos
de biologia molecular e diagnósticos de
doenças. Qual é o papel do primer em uma
PCR?

Question

A técnica de reação em cadeia da polimerase
(PCR) é amplamente utilizada em estudos
de biologia molecular e diagnósticos de
doenças. Qual é o papel do primer em uma
PCR? Alternativa A: O primer auxilia na separação das fitas de
DNA, permitindo a ligação da DNA polimerase
e aumentando a fita de DNA que está sendo
duplicada. Ou Alternativa B: O primer hibridiza-se à fita de DNA original,
permitindo que a DNA polimerase adicione os
desoxirribonucleotídeos à extremidade 3’. Ou Alternativa C: Os fragmentos de Okazaki são ligados a partir
da ação do primer que auxilia a DNA liga-se a
encontrar os fragmentos e ligá-los em uma fita
única. Ou Alternativa D: O primer auxilia a DNA gira-se a formar “bolhas
de replicação” permitindo a duplicação de ambas
as fitas de DNA simultaneamente. Ou Alternativa E: O primer rompe as pontes de hidrogênio
do DNA permitindo a hibridização dos
desoxirribonicleotídeos ao DNA e iniciando a
duplicação do DNA.

Qconcursos · Accepted Answer

Alternativa [B] O primer hibridiza-se à fita de DNA original,
permitindo que a DNA polimerase adicione os
desoxirribonucleotídeos à extremidade 3’. Gabarito: BFundamento decisivo: Na PCR, o primer é um oligonucleotídeo que se hibridiza à fita molde e fornece uma extremidade 3’-OH livre para a ação da DNA polimerase. Como a polimerase não inicia síntese de novo, a alternativa correta é a que descreve esse anelamento ao DNA molde e a extensão a partir da extremidade 3’, ou seja, a letra B.Tema central: Função do primer na PCRAnálise das alternativasAErradaEstá errada porque atribui ao primer a separação das fitas de DNA. Na PCR, a separação das fitas ocorre na etapa de desnaturação térmica por aquecimento; o primer não desenrola nem separa o DNA.BCertaA alternativa B está correta porque descreve o papel do primer na PCR: ele se liga por complementaridade à sequência-alvo da fita molde e permite que a DNA polimerase adicione desoxirribonucleotídeos à extremidade 3’. Esse anelamento é indispensável para iniciar a amplificação.CErradaEstá errada porque descreve ligação de fragmentos de Okazaki, processo relacionado à replicação celular in vivo e dependente de DNA ligase. Isso não corresponde à função do primer na PCR, que é iniciar a síntese ao se parear ao molde e permitir a extensão pela polimerase.DErradaEstá errada porque associa o primer à formação de bolhas de replicação. Bolhas de replicação pertencem à replicação cromossômica celular a partir de origens de replicação e não ao mecanismo operacional da PCR in vitro.EErradaEstá errada porque atribui ao primer a ruptura das pontes de hidrogênio do DNA. Na PCR, essa ruptura ocorre por desnaturação térmica, não por ação do primer. O primer atua depois, na etapa de anelamento, ligando-se por complementaridade à fita molde.Pegadinha da questãoA banca misturou o papel do primer com etapas e enzimas da replicação do DNA, como desnaturação térmica, helicase, ligase, fragmentos de Okazaki e bolhas de replicação.Dica para questões semelhantesEm PCR, associe primer a anelamento ao DNA molde e oferta de extremidade 3’-OH para extensão pela DNA polimerase.Se a alternativa disser que o primer separa fitas ou rompe pontes de hidrogênio, elimine: isso corresponde à desnaturação, não ao primer.Se a alternativa trouxer ligase, fragmentos de Okazaki ou bolhas de replicação, verifique se a banca está misturando replicação celular in vivo com PCR.

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A técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) é amplame...

Gabarito comentado

Gabarito: B

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