A espectrofotometria pode ser definida como toda técnica analítica que usa a luz para medir as concentrações das soluções, através da interação da luz com a matéria. Com base nisso, a análise espectrofotométrica deve ser realizada em quatro passos, os quais foram embolados no quadro a seguir:

A amostra deve ser preparada com a quebra da amostra por métodos mecânicos, químicos ou físicos

Em uma cubeta é colocado o solvente puro e lido no comprimento de onda o mesmo que será lida a amostra, esse procedimento é chamado leitura em branco, e tem como finalidade minimizar os erros causados, pela absorção luz ocasionados pelo vidro e pela água

A amostra é solubilizada no solvente escolhido em um balão volumétrico limpo e seco

A amostra é filtrada em uma membrana de 0,2 μm, por que a solução deve estar totalmente límpida a fim de diminuir ao máximo o erro causado por partículas em suspensão, a cubeta contendo o branco e retirado do equipamento e sua absorção anotada. Após esse processo a solução de interesse é lida, e dessa absorbância é subtraído a leitura do branco.



A sequência correta é: