A imunofixação e a imunoeletroforese são métodos
padrão-ouro para a caracterização de paraproteínas e
gamopatias monoclonais, enquanto a cromatografia
líquida de alta eficiência é utilizada para dosagens de
alta sensibilidade. Considerando as propriedades de
separação e detecção nessas técnicas, analise as
afirmativas a seguir.
I. A Imunofixação (IFE) substitui a Imunoeletroforese
clássica na rotina clínica por ser mais sensível e rápida
na identificação de cadeias leves (Kappa e Lambda) em
proteínas de Bence-Jones.
II. Na Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC) de
fase reversa, a fase estacionária é apolar e a fase móvel
é polar, fazendo com que analitos mais hidrofóbicos
tenham um maior tempo de retenção na coluna.
III. Na cromatografia gasosa, detectores de arranjo de
diodos realizam análise espectral ultravioleta diretamente
na fase gasosa e dispensam totalmente o uso de gás de
arraste no processo cromatográfico.
Está correto o que se afirma em:

Question

A imunofixação e a imunoeletroforese são métodos
padrão-ouro para a caracterização de paraproteínas e
gamopatias monoclonais, enquanto a cromatografia
líquida de alta eficiência é utilizada para dosagens de
alta sensibilidade. Considerando as propriedades de
separação e detecção nessas técnicas, analise as
afirmativas a seguir.
I. A Imunofixação (IFE) substitui a Imunoeletroforese
clássica na rotina clínica por ser mais sensível e rápida
na identificação de cadeias leves (Kappa e Lambda) em
proteínas de Bence-Jones.
II. Na Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC) de
fase reversa, a fase estacionária é apolar e a fase móvel
é polar, fazendo com que analitos mais hidrofóbicos
tenham um maior tempo de retenção na coluna.
III. Na cromatografia gasosa, detectores de arranjo de
diodos realizam análise espectral ultravioleta diretamente
na fase gasosa e dispensam totalmente o uso de gás de
arraste no processo cromatográfico.
Está correto o que se afirma em: Alternativa A: II apenas. Ou Alternativa B: I, II e III. Ou Alternativa C: I e II apenas.  Ou Alternativa D: I e III apenas.

Qconcursos · Accepted Answer

Alternativa [C] I e II apenas.  Gabarito: CFundamento decisivo: O ponto decisivo é reconhecer que a IFE é mais sensível e mais rápida que a imunoeletroforese clássica para caracterização de componentes monoclonais e cadeias leves, que na HPLC de fase reversa a fase estacionária é apolar e retém mais os analitos hidrofóbicos, e que a cromatografia gasosa exige gás de arraste; assim, I e II são verdadeiras e III é falsa, sustentando a alternativa C.Tema central: Princípios analíticos laboratoriaisAnálise das alternativasAErradaEstá errada porque exclui a afirmativa I, que é verdadeira. O ponto técnico decisivo é que imunofixação e imunoeletroforese clássica não têm desempenho equivalente na rotina: a IFE é mais sensível, mais rápida e mais prática para caracterização de gamopatias monoclonais e identificação de cadeias leves kappa e lambda, inclusive nas proteínas de Bence-Jones.BErradaEstá errada porque inclui a afirmativa III, que contradiz o princípio da cromatografia gasosa. Nesse método, a fase móvel é obrigatoriamente um gás de arraste; portanto, dizer que um detector de arranjo de diodos dispensaria totalmente o gás de arraste é tecnicamente incompatível com a técnica. Além disso, o detector de arranjo de diodos é classicamente associado à detecção UV/Vis em cromatografia líquida, não ao princípio definidor da cromatografia gasosa.CCertaA alternativa C está correta porque reúne exatamente as assertivas compatíveis com o funcionamento real dos métodos. A I está correta porque a imunofixação substituiu amplamente a imunoeletroforese clássica na rotina por maior sensibilidade analítica, maior rapidez e melhor definição de cadeias leves, inclusive na caracterização de proteína de Bence-Jones. A II também está correta porque, na HPLC de fase reversa, a fase estacionária é hidrofóbica/apolar e a fase móvel é relativamente polar, de modo que compostos mais hidrofóbicos interagem mais com a coluna e permanecem mais tempo retidos. A III é a única incorreta, o que torna correta a combinação I e II apenas.DErradaEstá errada por considerar a III verdadeira e desconsiderar a II. A II descreve corretamente a HPLC de fase reversa: fase estacionária apolar e maior retenção dos analitos mais hidrofóbicos. Já a III mistura conceitos de HPLC com cromatografia gasosa e nega requisito essencial da GC, que é o uso de gás de arraste.Pegadinha da questãoA banca mistura conceitos de técnicas diferentes: usa um detector classicamente ligado à cromatografia líquida para induzir erro na cromatografia gasosa e, ao mesmo tempo, testa se o candidato sabe que na fase reversa a coluna é apolar e que a imunofixação tem maior sensibilidade operacional que a imunoeletroforese clássica.Dica para questões semelhantesEm gamopatias monoclonais, diferencie desempenho dos métodos: imunofixação é mais sensível e mais rápida que a imunoeletroforese clássica para tipagem de componentes monoclonais e cadeias leves.Na HPLC de fase reversa, associe imediatamente: fase estacionária apolar, fase móvel mais polar, maior retenção dos compostos mais hidrofóbicos.Na cromatografia gasosa, elimine qualquer alternativa que negue a necessidade de gás de arraste, porque ele é componente indispensável do método.Não confunda função de detector com princípio de separação: detector não substitui fase móvel.

A imunofixação e a imunoeletroforese são métodos padrão-our...

Gabarito comentado

Gabarito: C

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