Vetores de expressão são construídos para direcionar a
síntese eficiente de antígenos vacinais em células hospedeiras. No contexto de vacinas de DNA, o plasmídeo
administrado deve conter elementos que assegurem tanto
sua replicação quanto a expressão do antígeno de forma
eficaz em células eucarióticas. Considerando os princípios do design de vetores plasmidiais para uso vacinal,
quais elementos são indispensáveis para que esse plasmídeo funcione adequadamente em células humanas?

Question

Vetores de expressão são construídos para direcionar a
síntese eficiente de antígenos vacinais em células hospedeiras. No contexto de vacinas de DNA, o plasmídeo
administrado deve conter elementos que assegurem tanto
sua replicação quanto a expressão do antígeno de forma
eficaz em células eucarióticas. Considerando os princípios do design de vetores plasmidiais para uso vacinal,
quais elementos são indispensáveis para que esse plasmídeo funcione adequadamente em células humanas?  Alternativa A: Genes de resistência a antibióticos e regiões promotoras bacterianas. Ou Alternativa B: Elementos transponíveis e sítios de ligação ao telômero. Ou Alternativa C: Inteínas autorreguladoras e sítios de splicing alternativo. Ou Alternativa D: Promotores eucarióticos, sinal de poliadenilação e
origem de replicação. Ou Alternativa E: Genes que codificam adjuvantes imunológicos endógenos.

Qconcursos · Accepted Answer

Alternativa [D] Promotores eucarióticos, sinal de poliadenilação e
origem de replicação. Gabarito: DFundamento decisivo: O critério decisivo é reconhecer quais elementos mínimos permitem a propagação do plasmídeo e a expressão do antígeno em célula humana. Como o enunciado exige um vetor de vacina de DNA funcional em sistema eucariótico, o plasmídeo deve conter origem de replicação, promotor eucariótico e sinal de poliadenilação; esse conjunto define a alternativa D.Tema central: Vetor plasmidial vacinalAnálise das alternativasAErradaEstá errada porque mistura um elemento útil na seleção bacteriana, o gene de resistência a antibiótico, com um elemento inadequado para a etapa decisiva da questão, o promotor bacteriano. A expressão do antígeno em célula humana exige promotor eucariótico; promotores bacterianos não são reconhecidos adequadamente pela maquinaria transcricional humana.BErradaEstá errada porque elementos transponíveis e sítios de ligação ao telômero não fazem parte do módulo básico necessário para um plasmídeo vacinal expressar antígeno em células humanas. Esses componentes não são requisitos mínimos para transcrição do antígeno nem para a propagação plasmidial descrita na base.CErradaEstá errada porque inteínas autorreguladoras e sítios de splicing alternativo são recursos especializados, não componentes universais e indispensáveis de vacinas de DNA. Eles não substituem os elementos básicos exigidos para replicação/manutenção do plasmídeo e para expressão eucariótica do antígeno.DCertaA alternativa D reúne os componentes indispensáveis do vetor plasmidial de vacina de DNA. O promotor eucariótico é necessário porque a transcrição do gene do antígeno deve ocorrer em célula humana, portanto depende da maquinaria transcricional eucariótica. O sinal de poliadenilação é necessário para término adequado da transcrição e para processamento e estabilidade do mRNA, favorecendo sua tradução. A origem de replicação é necessária para manutenção e amplificação do plasmídeo durante sua produção como vetor plasmidial. Esse conjunto contempla exatamente as duas funções cobradas: propagação do plasmídeo e expressão eficaz do antígeno.EErradaEstá errada porque genes codificando adjuvantes imunológicos podem ser acessórios para aumentar imunogenicidade, mas não constituem requisito estrutural mínimo do vetor. Eles não suprem a necessidade de promotor eucariótico, sinal de poliadenilação e origem de replicação.Pegadinha da questãoA banca explora a confusão entre elementos úteis na clonagem ou seleção bacteriana e os elementos realmente necessários para expressão do antígeno em células humanas; o erro clássico é aceitar promotor bacteriano ou genes acessórios como se fossem requisitos básicos do vetor vacinal.Dica para questões semelhantesSepare sempre duas funções do plasmídeo: propagação do vetor e expressão do transgene no hospedeiro.Para expressão em célula humana, procure elementos de expressão eucariótica, especialmente promotor e sinal de poliadenilação.Não trate marcador de seleção, genes adjuvantes ou módulos sofisticados de engenharia como componentes mínimos obrigatórios.Se a alternativa não contemplar simultaneamente replicação/manutenção do plasmídeo e expressão eucariótica do antígeno, ela não atende ao núcleo da questão.

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Vetores de expressão são construídos para direcionar a sínt...

Gabarito comentado

Gabarito: D

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