Tema central: A questão trata do Southern blot, uma das técnicas clássicas de biologia molecular amplamente exigida em concursos para área de suporte acadêmico.

Explicação Didática: O Southern blot, criado por Edwin Southern (1975), é usado para detectar fragmentos específicos de DNA em uma amostra biológica. O processo envolve:

• Digestão do DNA com enzimas de restrição, gerando fragmentos.
• Eletroforese dos fragmentos em gel de agarose, separando-os pelo tamanho.
• Transferência do DNA do gel para uma membrana (nitrocelulose/nylon).
• Hibridização da membrana com uma sonda marcada, complementar à sequência-alvo.
• Detecção da sonda, revelando a presença e o tamanho do DNA de interesse.

Justificativa da alternativa correta (C):

Alternativa C descreve com precisão o objetivo e procedimento do Southern blot: “Análise da presença e tamanho de fragmentos específicos de DNA após corte enzimático”. Os termos “DNA”, “fragmentos específicos” e “corte enzimático” são chaves para associar à técnica correta.

Análise das alternativas incorretas:

• A) Refere-se ao Northern blot, usada para RNA – não DNA.
• B) Trata da detecção de proteínas via Western blot, técnica distinta.
• D) Descreve amplificação de RNA, processo de RT-PCR, não relacionado ao Southern blot.
• E) Diz respeito à etapa de visualização do Northern blot, voltada a RNA, e não ao Southern blot nem à análise por sondas.

Estratégias e Pegadinhas:

Note o uso frequente de termos “DNA”, “RNA”, “proteína” e tipos de sondas. Trocas sutis como essas são armadilhas clássicas. Sempre relacione a molécula alvo, o método de detecção e a palavra-chave (Southern = DNA, Northern = RNA, Western = proteína).

Obra de referência: Amabis & Martho, Biologia Celular (Volume 2, Moderna) esclarece detalhadamente esses métodos e suas diferenças.

Resumo: O Southern blot é exclusivo para DNA, sendo ferramenta fundamental para estudos genéticos e análises em concursos.

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1- Southern Blot (DNA): Utilizado para detectar sequências específicas de DNA, envolvendo restrição por enzimas, eletroforese em gel de agarose, desnaturação e hibridização com sondas marcadas.

2- Northern Blot (RNA): Utilizado para detectar moléculas específicas de RNA (geralmente mRNA) para analisar a expressão gênica, envolvendo eletroforese em gel desnaturante e hibridização com sondas.

3- Western Blot (Proteínas): Utilizado para detectar proteínas específicas, utilizando eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) e detecção por anticorpos específicos (imunodetecção).