Alternativa correta: B - Cromatografia de afinidade por proteína A.

Tema central: A questão trata sobre purificação de anticorpos diretamente do sobrenadante de culturas celulares, buscando métodos que garantam alta pureza e rendimento em um único passo. Isso é fundamental em laboratórios de biotecnologia e produção farmacêutica, onde a eficiência e a qualidade do produto final são essenciais.

Resumo teórico: A cromatografia de afinidade é uma das técnicas mais poderosas para purificar biomoléculas. Especificamente, a proteína A, presente em Staphylococcus aureus, se liga com alta afinidade à fração Fc de imunoglobulinas (anticorpos IgG) de diversas espécies. Assim, anticorpos presentes no sobrenadante celular aderem à proteína A imobilizada em uma matriz cromatográfica, permitindo sua separação dos demais componentes em um único passo, com alto grau de pureza e rendimento. (Fonte: NCBI)

Justificativa da alternativa correta: A cromatografia de afinidade por proteína A (alternativa B) é o método preferencial para purificar anticorpos monoclonais ou policlonais diretamente do meio de cultura, devido à sua especificidade e eficiência, reduzindo etapas e perdas.

Análise das alternativas incorretas:

• A - Cromatografia de afinidade por quelatos metálicos: Indicada para proteínas recombinantes com tags específicas (ex: His-tag), não para anticorpos nativos.
• C - Ultrafiltração: Concentra moléculas, mas não separa anticorpos de outras proteínas ou contaminantes.
• D - Diafiltração: Similar à ultrafiltração, visa troca de tampão, mas não purificação seletiva.
• E - Cromatografia de interações hidrofóbicas: Baseada em interações não-específicas, não garante alta pureza de anticorpos.

Estratégia de prova: Atenção para termos como “método preferencial”, “pureza elevada” e “um único passo”. Eles direcionam para técnicas extremamente específicas e eficientes, como a afinidade por proteína A, afastando opções mais genéricas ou de uso auxiliar.

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