Ao projetar um vetor de expressão para a produção de proteí...
Assinale a alternativa que apresenta apenas componentes fundamentais para esse tipo de vetor, considerando seu uso convencional.
Gabarito comentado
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Alternativa correta: A
Tema central: A questão aborda os elementos essenciais em vetores de expressão para produção de proteínas recombinantes em Escherichia coli. Para responder, é fundamental conhecer a estrutura básica desses vetores e sua função em biotecnologia.
Resumo teórico: Vetores de expressão são moléculas de DNA (geralmente plasmídeos) projetadas para introduzir e expressar genes de interesse em organismos hospedeiros, como bactérias. Os elementos fundamentais de um vetor convencional para E. coli incluem:
- Origem de replicação (ori): Permite ao plasmídeo se replicar dentro da célula hospedeira.
- Promotor forte: Garante expressão eficiente do gene de interesse.
- Gene de resistência a antibiótico: Permite a seleção das bactérias transformadas.
- Sítio de clonagem múltipla (MCS): Região com vários sítios de restrição para inserção do gene.
- Região de terminação: Finaliza a transcrição corretamente.
Referências: Brown, T. A. "Gene Cloning and DNA Analysis", 7ª ed.; Addgene Reference.
Justificativa da alternativa A: Esta alternativa reúne todos os componentes fundamentais citados acima, tornando o vetor funcional e eficiente para expressão gênica em E. coli.
Análise das alternativas incorretas:
- B: Inclui sequência telomérica e íntron artificial, que não são necessários ou funcionais em bactérias.
- C: O promotor de RNA polimerase III é típico de eucariotos, não de bactérias, e gene repórter não é fundamental.
- D: Cita operon telomérico e sequência de inserção viral, que não são essenciais para vetores bacterianos convencionais.
- E: Traz gene supressor de silenciamento gênico e íntron regulador, itens de uso em eucariotos, não em E. coli.
Estratégia para interpretação: Atenção aos termos específicos para bactérias. Fique atento a palavras que remetem a estruturas eucarióticas (íntron, telômero) e elimine alternativas que tragam elementos não bacterianos.
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