Alternativa correta: E

Tema central: O foco desta questão é o uso de His-tags (tags de histidina) para purificação de proteínas recombinantes. Este é um tema comum em biologia molecular e biotecnologia, frequentemente explorado em concursos para a área de farmácia, pois envolve técnicas modernas de manipulação e análise de proteínas.

Resumo teórico: As His-tags são pequenas sequências (geralmente 6 a 10 resíduos) de histidinas adicionadas à proteína produzida em organismos hospedeiros. Esta etiqueta facilita a purificação, pois as histidinas têm alta afinidade por íons metálicos como o níquel (Ni²⁺) ou o cobre (Cu²⁺) presentes em colunas cromatográficas. Após a purificação, a tag pode ou não ser removida, dependendo do uso posterior da proteína (referências: Sambrook & Russell, Molecular Cloning; Guia NEB His-tag Purification).

Justificativa da alternativa E (correta):
Ela descreve exatamente o método: a purificação por His-tag é feita em colunas de níquel ou cobre. Além disso, destaca que a tag pode ser removida dependendo da aplicação — essencial em pesquisas ou produção industrial quando se deseja a proteína sem modificações extras.

Análise das alternativas incorretas:

• A: Diz que as His-tags se ligam a proteínas de choque térmico, o que é incorreto: elas se ligam a íons metálicos, não a proteínas específicas.
• B: Menciona resinas de cálcio ou magnésio, mas as resinas corretas utilizam níquel ou cobre.
• C: Afirma que a tag sempre interfere na atividade da proteína e precisa ser removida. Na verdade, em muitos casos, a tag não interfere e pode ser mantida.
• D: Generaliza dizendo que a tag impede o dobramento da proteína, o que não é regra e, na maioria dos casos, não ocorre.

Dica de interpretação: Ao analisar questões sobre técnicas laboratoriais, busque por características técnicas precisas (tipo de resina, metal empregado, possibilidade de remoção da tag). Cuidado com afirmações absolutas ("sempre", "nunca") e com descrições de mecanismos errados.

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