Na purificação de peptídios dentro dessa faixa de massa mole...
Em um laboratório de pesquisa, foi isolado de hemolinfa de insetos um novo peptídio antifúngico de massa molecular 3 kDa e pI igual a 8. Considerando tais características e os diferentes métodos cromatográficos atualmente disponíveis para a purificação de proteínas e peptídios, julgue os itens a seguir.
Na purificação de peptídios dentro dessa faixa de massa molecular — aproximadamente em torno de 3 kDa —, são muito empregadas colunas de fase reversa com matriz C18.
Gabarito comentado
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A alternativa correta é: C - certo
Vamos entender melhor o porquê dessa escolha.
O enunciado da questão descreve um peptídeo antifúngico isolado de hemolinfa de insetos, com massa molecular de 3 kDa e ponto isoelétrico (pI) igual a 8. Para resolver essa questão, é essencial ter conhecimentos sobre métodos de purificação de peptídeos e proteínas, especificamente cromatografia.
Dentro da faixa de massa molecular mencionada (aproximadamente 3 kDa), um dos métodos mais frequentemente utilizados é a cromatografia de fase reversa. Este método emprega colunas com matriz C18, que são altamente eficazes para separar e purificar peptídeos e proteínas de pequenas e médias massas moleculares.
A cromatografia de fase reversa funciona com base na hidrofobicidade das moléculas. A matriz C18 é composta por cadeias alquílicas (18 átomos de carbono) que interagem com as partes hidrofóbicas do peptídeo, facilitando a separação com base na afinidade hidrofóbica.
Portanto, considerando a massa molecular de 3 kDa e as propriedades hidrofóbicas, a utilização de colunas de fase reversa com matriz C18 é uma escolha apropriada e comum, justificando a alternativa C - certo.
Alternativas incorretas:
Não foram apresentadas alternativas incorretas na questão. No entanto, para fins de entendimento, vamos discutir brevemente outras técnicas de cromatografia que não seriam tão eficazes para este peptídeo específico:
- Cromatografia de troca iônica: Seria menos eficaz aqui, pois é mais adequada para separar proteínas com base em suas cargas elétricas, e não tanto em termos de hidrofobicidade.
- Cromatografia de exclusão por tamanho: É utilizada para separar proteínas com base no tamanho, mas para moléculas tão pequenas quanto 3 kDa, a resolução pode não ser a ideal.
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