Para o monitoramento epidemiológico e controle da transmissão do vírus Sars-Cov-2 é essencial a testagem
laboratorial. Um dos métodos utilizados é a RT-PCR (Reação em cadeia da transcriptase reversa). Sobre esta
técnica é correto afirmar:

Question

Para o monitoramento epidemiológico e controle da transmissão do vírus Sars-Cov-2 é essencial a testagem
laboratorial. Um dos métodos utilizados é a RT-PCR (Reação em cadeia da transcriptase reversa). Sobre esta
técnica é correto afirmar: Alternativa A: A RT-PCR é um método da biologia molecular, que permite identificar a presença do material genético (DNA) do vírus
Sars-Cov-2 em amostras de secreção respiratória. Ou Alternativa B: A amostra de RNA presente no Sars-Cov-2 é convertida para cDNA (DNA complementar) pela transcrição reversa
para posterior amplificação propriamente dita.  Ou Alternativa C: A DNA polimerase juntamente com os íons Na+, que são cofatores indispensáveis para atividade da enzima, agem
na desnaturação da cadeia molde antecedendo a etapa de amplificação.  Ou Alternativa D: Como a reação da PCR sempre parte de um DNA molde extraído convenientemente da amostra, resultados falsopositivos ocorrem com frequência, pois no método de RT-PCR não há a conversão de RNA para DNA.

Qconcursos · Accepted Answer

Alternativa [B] A amostra de RNA presente no Sars-Cov-2 é convertida para cDNA (DNA complementar) pela transcrição reversa
para posterior amplificação propriamente dita.  Gabarito: BFundamento decisivo: A questão cobra o princípio técnico da RT-PCR aplicada ao Sars-Cov-2, um vírus de RNA: nessa técnica, o RNA viral deve ser transcrito reversamente em cDNA antes da amplificação por PCR. Esse critério torna a alternativa B correta e afasta as demais.Tema central: Princípio da RT-PCRAnálise das alternativasAErradaEstá errada porque atribui ao Sars-Cov-2 material genético de DNA. O vírus tem genoma de RNA. Na RT-PCR, o DNA aparece apenas como cDNA gerado na técnica, não como material genético original do vírus.BCertaA alternativa B está correta porque descreve a etapa essencial da RT-PCR aplicada ao Sars-Cov-2: o RNA viral extraído da amostra é convertido em DNA complementar por transcrição reversa, e esse cDNA passa a servir de molde para a amplificação por PCR. Esse é exatamente o fundamento técnico do método quando o alvo é um vírus de RNA.CErradaEstá errada por dois motivos técnicos: a DNA polimerase na PCR depende de íons divalentes, especialmente Mg2+, e não de Na+ como cofator indispensável; além disso, a desnaturação da fita molde ocorre pelo aquecimento no termociclador, não pela ação da polimerase.DErradaEstá errada porque nega justamente a etapa que define a RT-PCR: a conversão de RNA em DNA complementar. PCR convencional amplifica DNA; quando o alvo é RNA viral, é obrigatória a transcrição reversa antes da amplificação. A justificativa apresentada para falso-positivo também não se sustenta pelo mecanismo descrito.Pegadinha da questãoA banca explorou a confusão entre o genoma original do Sars-Cov-2, que é RNA, e o cDNA produzido durante a técnica, além de induzir erro ao sugerir que a PCR amplifica RNA diretamente.Dica para questões semelhantesSe o alvo for vírus de RNA, procure a etapa de transcrição reversa antes da PCR.Separe o material genético do agente do produto intermediário gerado pela técnica: no Sars-Cov-2, o genoma é RNA, mas a PCR amplifica cDNA.Na PCR, desnaturação é etapa térmica; não atribua essa função à DNA polimerase.Em questões de mecanismo da PCR, desconfie de cofatores trocados: a base correta menciona íons divalentes, especialmente Mg2+.

Para o monitoramento epidemiológico e controle da transmissã...

Gabarito comentado

Gabarito: B

Clique para visualizar este gabarito

Questões de assuntos semelhantes

Provas relacionadas