Somente o tamanho dos iniciadores tem influência sobre a T _m.

Depende unicamente do conteúdo de ligações AT nos iniciadores.

A composição de bases e tamanho dos iniciadores influenciam a T _m.

As fórmulas para calcular a Tm podem ser divididas em básicas, dependentes do conteúdo de GC e baseadas na termodinâmica.

Corresponde a temperatura na qual se obtém a maior formação de híbridos gerados pelo estabelecimento de pontes de hidrogênio entre os nucleotídeos complementares.