Em relação às técnicas de amplificação mediada por transcrição
(TMA) e de amplificação baseada na sequência de ácido nucleico
(NASBA), analise as afirmativas a seguir e assinale (V) para a
verdadeira e (F) para a falsa.
( ) TMA se baseia em um ciclo contínuo isotérmico de
amplificação, no qual a transcriptase reversa produz fitas de
cDNA e, em seguida, a RNA polimerase; a partir deste,
sintetiza novas fitas de RNA.
( ) Para diagnóstico de M. tuberculosis, TMA é mais sensível que
PCR pelo fato de detectar sequências de rRNA que possuem
um número maior de cópias por célula do que o DNA.
( ) NASBA, ao contrário de TMA, depende do uso de
termocicladores uma vez que há temperaturas diferentes de
desnaturação, anelamento e extensão.
As afirmativas são, na ordem apresentada, respectivamente,

Question

Em relação às técnicas de amplificação mediada por transcrição
(TMA) e de amplificação baseada na sequência de ácido nucleico
(NASBA), analise as afirmativas a seguir e assinale (V) para a
verdadeira e (F) para a falsa.
( ) TMA se baseia em um ciclo contínuo isotérmico de
amplificação, no qual a transcriptase reversa produz fitas de
cDNA e, em seguida, a RNA polimerase; a partir deste,
sintetiza novas fitas de RNA.
( ) Para diagnóstico de M. tuberculosis, TMA é mais sensível que
PCR pelo fato de detectar sequências de rRNA que possuem
um número maior de cópias por célula do que o DNA.
( ) NASBA, ao contrário de TMA, depende do uso de
termocicladores uma vez que há temperaturas diferentes de
desnaturação, anelamento e extensão.
As afirmativas são, na ordem apresentada, respectivamente, Alternativa A: F – V – F. Ou Alternativa B: F – V – V. Ou Alternativa C: V – F – F. Ou Alternativa D: V – V – F. Ou Alternativa E: F – F – V.

Qconcursos · Accepted Answer

Alternativa [D] V – V – F. Técnicas de Amplificação em Biologia Molecular

Para entender a questão, é essencial conhecer as técnicas de amplificação de ácidos nucleicos, como TMA (Amplificação Mediada por Transcrição) e NASBA (Amplificação Baseada na Sequência de Ácido Nucleico). Ambas são usadas para detectar material genético, mas possuem princípios e aplicações distintas.

Análise das Afirmativas:

(1) TMA se baseia em um ciclo contínuo isotérmico de amplificação... - Essa afirmativa está correta. O TMA é uma técnica que utiliza um processo isotérmico, ou seja, ocorre a uma temperatura constante, para amplificar RNA através da ação de transcriptase reversa e RNA polimerase. Essa técnica é eficiente porque não requer mudanças de temperatura como a PCR.

(2) Para diagnóstico de M. tuberculosis, TMA é mais sensível que PCR... - Essa afirmativa está correta. O TMA é mais sensível para detectar M. tuberculosis porque amplifica rRNA, que está presente em maior quantidade nas células do que o DNA genômico. Isso aumenta a sensibilidade da detecção, especialmente em amostras com baixa carga bacteriana.

(3) NASBA, ao contrário de TMA, depende do uso de termocicladores... - Essa afirmativa está incorreta. Assim como TMA, o NASBA também é uma técnica isotérmica e não requer termocicladores. Ambas as técnicas são projetadas para funcionar a uma temperatura constante, diferenciando-se da PCR tradicional, que necessita de termociclagem.

Justificativa para a Alternativa Correta:

A alternativa correta é a D - V – V – F, pois as duas primeiras afirmativas descrevem corretamente as características e vantagens do TMA em relação à sensibilidade e método de amplificação. A última afirmativa está incorreta por descrever erroneamente a necessidade de termocicladores no NASBA, que, assim como TMA, opera isotermicamente.

Conclusão: Compreender as diferenças entre essas técnicas de amplificação é crucial para sua aplicação adequada em diagnósticos clínicos, especialmente em condições onde a detecção sensível de RNA é necessária.

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