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Q3329651 Técnicas em Laboratório
Algumas técnicas são empregadas, rotineiramente, em imunodiagnóstico de doenças infecciosas. Uma das mais utilizadas em laboratórios de análises clínicas ou de pesquisa é o Ensaio imunoenzimático - ELISA ou suas variáveis. Sobre essa técnica pode-se afirmar que: 
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Tema central: Técnicas de imunodiagnóstico, com foco no ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), método que usa anticorpos ou antígenos conjugados a enzimas para detectar anticorpos ou antígenos em amostras clínicas por leitura colorimétrica em microplacas.

Alternativa correta: A
A afirmação está alinhada ao princípio do ELISA: dependendo do alvo, usa-se anticorpos marcados com enzima (ELISA indireto ou sanduíche) ou antígenos marcados com enzima (ELISA competitivo). Exemplos práticos: detecção de anti-HIV (indireto: anti-IgG humano-HRP), HBsAg (sanduíche: anticorpo de captura + anticorpo de detecção enzimático) e hormônios em formato competitivo (antígeno enzimático compete com o da amostra). Enzimas comuns: HRP (peroxidase) e fosfatase alcalina. Referências: Janeway’s Immunobiology; Tietz Textbook of Clinical Chemistry; recomendações OMS/CDC para triagem sorológica.

Por que as demais estão incorretas?

B) Descreve Western blot: proteínas separadas por eletroforese, transferidas para nitrocelulose e detectadas por anticorpos marcados. É método confirmatório clássico (ex.: HIV), não é ELISA, que ocorre em microplaca e leitura enzimática colorimétrica.

C) Descreve Imunofluorescência direta: uso de fluorocromos (p.ex., FITC) com emissão de fluorescência. ELISA não usa fluorescência como princípio padrão, e sim enzimas e substratos cromogênicos (p.ex., TMB para HRP).

D) Descreve aglutinação (hemácias, látex): anticorpos formam pontes entre partículas, gerando aglutinados visíveis. No ELISA não há aglutinação; há ligação em fase sólida e detecção enzimática.

E) Descreve imunoprecipitação em gel (imunodifusão de Ouchterlony/radial): formação de linhas/bandas de precipitação no ágar. ELISA não forma linhas em gel; utiliza sinal colorimétrico em poços de microplaca.

Dicas de prova (pegadinhas):
- Palavras-chave do ELISA: enzima, microplaca, substrato cromogênico, leitura colorimétrica.
- Nitrocelulose → pense em Western blot.
- Fluorescência → pense em imunofluorescência.
- Aglutinaçãohemaglutinação/latex.
- Bandas no gelimunodifusão.

Aplicação prática: ELISA é recomendado por OMS/CDC como teste de triagem para inúmeras infecções (HIV, hepatites), por ser sensível, específico e automatizável. Saber distinguir seus formatos (indireto, sanduíche, competitivo) orienta a escolha do ensaio no laboratório e a interpretação do resultado.

Referências rápidas: Janeway’s Immunobiology; Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics; UpToDate (serologic testing); diretrizes OMS/CDC para triagem sorológica.

Gabarito: A

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