Alguns métodos de conjugação de proteína com fluoróforo suge...

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Q573894

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Desenvolvimento de Insumos Biológicos para a Saúde |

Q573894 Técnicas em Laboratório

Alguns métodos de conjugação de proteína com fluoróforo sugerem o uso de Carboxifluoresceina N-Succinimidyl Ester (CFSE) no lugar de Isotiocianato de Fluoresceína (FITC), por fornecerem melhor resultado de marcação. Os Succinimidyl Esteres são reagentes excelentes por sofrerem amino modificações, uma vez que os produtos amídicos formados são muito estáveis. CFSE possui alta reatividade com aminas alifáticas e baixa reatividade com aminas aromáticas. Sobre as estruturas abaixo, assinale a melhor alternativa.
Imagem associada para resolução da questão

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Por apresentar alta reatividade com tirosinas, o CFSE é indicado para conjugar proteínas que são usadas em ensaio de incorporação celular.

Devido a característica do CFSE, os tampões contendo TRIS, não são os mais aceitáveis por interferirem na marcação.

O grupo funcional succinimidil-éster, ligado ao núcleo fluoresceína, produz o CFSE e formam derivados de amina reativos que possuem maior especificidade com muitas outras aminas na presença de outros nucleófilos.

a proteína marcada é separada do composto fluorescente com o uso de uma coluna de troca aniônica, seguida de extensiva diálise contra PBS.

o CFSE é um composto fluorescente usado eficientemente como marcador celular.

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