Muitos métodos bioquímicos podem ser usados para purificação...
Gabarito comentado
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O tema central da questão envolve técnicas bioquímicas para a purificação de imunoglobulinas, especificamente a IgG humana. Isso é relevante em laboratórios de pesquisa e diagnóstico, onde a pureza das proteínas é fundamental para análises precisas.
Justificativa para a alternativa correta (D):
A alternativa D afirma que o acompanhamento da eluição das proteínas do soro não ligadas à matriz sólida pode ser feito com a leitura da absorbância do eluato a 680 nm. No entanto, isso está incorreto. A leitura de absorbância para proteínas geralmente é feita em torno de 280 nm, que é a faixa em que os aminoácidos aromáticos absorvem luz (especificamente, o triptofano e a tirosina). A leitura a 680 nm não é padrão para a detecção de proteínas, já que essa faixa é usada para outras substâncias, como pigmentos fotossintéticos. Portanto, a alternativa D é a incorreta.
Análise das alternativas incorretas:
A: A precipitação de proteínas com ácido caprílico e sulfato de sódio é uma técnica comum para a purificação preliminar de IgG. Esse método é eficaz para remover impurezas e concentrar a proteína desejada. Portanto, essa afirmação está correta.
B: A cromatografia de troca iônica é uma técnica que pode ser usada para purificar IgG devido ao seu ponto isoelétrico (pI) específico. As proteínas se separam com base em suas cargas em diferentes pHs, e a IgG pode ser isolada por ter um pI diferente das demais proteínas do soro. Esta afirmação está correta.
C: A cromatografia de afinidade para purificação de IgG frequentemente envolve a alteração do pH do tampão de eluição para dissociar a IgG da matriz sólida. Isso é um procedimento padrão, tornando esta afirmação correta.
E: A cromatografia de troca iônica pode usar resinas trocadoras de ânions com tampões de fase móvel ajustados acima do ponto isoelétrico da IgG para facilitar a separação. Esta técnica é válida e a afirmação está correta.
Compreender as especificidades técnicas de cada método é crucial para a correta interpretação dos resultados laboratoriais e para garantir que as análises sejam feitas de forma precisa e eficiente.
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