As separações em Cromatografia Líquida de Alta Eficiência po...

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Q573643 Técnicas em Laboratório
As separações em Cromatografia Líquida de Alta Eficiência podem se dar por adsorção, partição ou ambos. O suporte mais comumente utilizado é a sílica. O uso de suportes modificados possibilita a produção de uma imensa variedade de colunas com diferentes propriedades e tipos de seletividade. As fases assim obtidas, dependendo da modificação feita ao suporte, podem atuar no modo normal, reverso ou ambos. Com relação à cromatografia de fase reversa, assinale a afirmativa incorreta.
Alternativas

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A questão aborda a Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), especificamente no contexto da cromatografia de fase reversa. Esse método é amplamente utilizado para separar e analisar compostos químicos com base em suas polaridades.

A alternativa correta, que é a incorreta em relação à cromatografia de fase reversa, é a alternativa D. A afirmação de que "a água é componente essencial da mistura da fase móvel" não é absoluta, pois a fase móvel na cromatografia de fase reversa pode variar. Embora a água seja frequentemente usada como um dos componentes da fase móvel, ela não é essencial em todos os casos. Misturas de solventes orgânicos, como acetonitrila ou metanol, podem ser usadas em diferentes proporções, dependendo da análise específica.

Justificativas para as alternativas:

A - A fase C18 (octadecilsílica) é de fato a mais usada na cromatografia de fase reversa devido à sua capacidade de reter uma ampla gama de compostos, especialmente aqueles de natureza não polar. Isso se alinha com a prática comum em laboratórios de bioquímica.

B - Na cromatografia de fase reversa, os componentes da amostra eluem em ordem de polaridade, com os mais polares saindo primeiro. Isso ocorre porque a fase estacionária é não polar, enquanto a fase móvel é mais polar, o que faz com que compostos polares tenham menor afinidade pela fase estacionária e eluam antes.

C - É correto que a fase móvel consiste em uma mistura de solventes nos quais a amostra apresenta diferentes solubilidades, permitindo a separação dos compostos com base em suas interações com a fase móvel e estacionária.

E - A cromatografia de fase reversa é usada para separar produtos proteicos derivados de clivagem enzimática. Contudo, é importante notar que este método pode não preservar a atividade biológica dos produtos devido às condições de separação, como a presença de solventes orgânicos.

Ao analisar questões de cromatografia, é crucial entender o papel das fases estacionária e móvel, bem como a interação entre elas e os analitos. Isso ajuda a identificar pegadinhas, como a noção de que certos componentes são sempre necessários.

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Comentários

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Gabarito D

 

Ainda sobre o item d), não que a água não seja comumente usada na mistura da fase móvel, porém, a restrição com a palavra "essencial" tornou incorreta a alternativa. 

Eu achei que o gabarito fosse letra E. A cromatografia não preserva atividade biológica? Alguém sabe explicar?

A letra B não está incorreta também? Na CLAE, os componentes menos polares eluem antes.

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