Gabarito: Alternativa A – 8 e 24 mg/mL.

1. Tema central da questão:

Esta questão aborda o método de cristalização de proteínas por difusão de vapor, uma técnica fundamental em bioquímica estrutural. O candidato deve compreender conceitos de proporção, diluição e equilíbrio de concentrações ao misturar soluções.

2. Resumo teórico:

No método de difusão de vapor, misturam-se solução de proteína e solução do poço para formar uma gota. O equilíbrio entre a gota e a solução do poço ocorre por difusão de vapor, alterando as concentrações. O cálculo inicial envolve regra de três para misturas e depois considera-se o volume final igualando-se ao do poço ao alcançar o equilíbrio.

3. Justificativa da alternativa correta:

A mistura é feita em proporção 2:1 (duas partes de proteína para uma parte do poço). Se usarmos, por exemplo, 20 μL de proteína (a 12 mg/mL) e 10 μL de poço, o volume total da gota será 30 μL.

Cálculo da concentração inicial:

Quantidade de proteína: 20 μL × 12 mg/mL = 240 μg

Concentração inicial na gota: 240 μg / 30 μL = 8 mg/mL

Cálculo ao equilíbrio:

Quando a gota atingir o equilíbrio, seu volume diminui e só a proteína permanece, então a concentração final será igual à soma das massas de proteína nas duas soluções dividida pelo volume final (que será igual ao volume da solução do poço, ou seja, a gota evaporou até ter 1/3 do seu volume inicial):

Volume final = 10 μL
Concentração = 240 μg / 10 μL = 24 mg/mL

Logo, a resposta correta é A – 8 e 24 mg/mL.

4. Análise das alternativas incorretas:

• B - 5 e 10 mg/mL: Erro nos cálculos de proporção e volume final.
• C - 3 e 10 mg/mL: Não corresponde à realidade da mistura nem do equilíbrio.
• D - 5 e 20 mg/mL: Subestima a concentração inicial e a final.
• E - 7 e 10 mg/mL: Erra na concentração inicial e não considera o aumento da concentração ao evaporar.

5. Estratégias para interpretar o enunciado:

Fique atento a proporções, regra de três e ao conceito de evaporação e concentração. Evite “chutar” cálculos, monte sempre uma equação com os volumes e massas envolvidos.

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