Sobre a obtenção de culturas primárias de linfócitos e macró...

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Q568016 Técnicas em Laboratório
Sobre a obtenção de culturas primárias de linfócitos e macrófagos a partir do sangue periférico, analise as afirmativas a seguir.

I. O sangue periférico deve ser coletado na presença de um anti-coagulante.

II. O sangue periférico deve ser misturado com volumes iguais de solução salina ou PBS e adicionado cuidadosamente no topo de algum tipo de composto que agrega eritrócitos (polímeros de polissacarídeos) e aumenta a taxa de sedimentação destas células. Assim sendo, os eritrócitos serão sedimentados após centrifugação enquanto os leucócitos poderão ser coletados a partir do sobrenadante.

III. Após a obtenção dos leucócitos, estes devem ser inoculados em placas de plástico contendo meio nutritivo rico por um período de 30 minutos a duas horas a uma temperatura de 37°C. Após este período, os monócitos estarão aderidos ao suporte plástico e os linfócitos estarão soltos no sobrenadante, estes últimos são transferidos para outro frasco de cultivo, enquanto os monócitos serão cultivados por no mínimo sete dias para sua diferenciação em macrófagos.

Assinale:
Alternativas

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Para compreender a questão sobre a obtenção de culturas primárias de linfócitos e macrófagos a partir do sangue periférico, vamos analisar cada afirmativa individualmente.

Afirmativa I: "O sangue periférico deve ser coletado na presença de um anticoagulante."

Isso é correto. A coleta de sangue em um anticoagulante é essencial para evitar a coagulação, permitindo a separação das células sanguíneas. Anticoagulantes comuns incluem EDTA, heparina ou citrato. Essa prática garante que as células permaneçam em suspensão e possam ser facilmente manipuladas para a cultura.

Afirmativa II: "O sangue periférico deve ser misturado com volumes iguais de solução salina ou PBS e adicionado cuidadosamente no topo de algum tipo de composto que agrega eritrócitos (polímeros de polissacarídeos) e aumenta a taxa de sedimentação destas células. Assim sendo, os eritrócitos serão sedimentados após centrifugação enquanto os leucócitos poderão ser coletados a partir do sobrenadante."

Esta afirmação está correta. O uso de soluções como Ficoll ou Percoll é comum para separar leucócitos de eritrócitos. Esses compostos, que são polímeros de polissacarídeos, ajudam na sedimentação dos eritrócitos durante a centrifugação, permitindo que os leucócitos sejam coletados do sobrenadante. Essa técnica é um método padrão em laboratórios de imunologia.

Afirmativa III: "Após a obtenção dos leucócitos, estes devem ser inoculados em placas de plástico contendo meio nutritivo rico por um período de 30 minutos a duas horas a uma temperatura de 37°C. Após este período, os monócitos estarão aderidos ao suporte plástico e os linfócitos estarão soltos no sobrenadante, estes últimos são transferidos para outro frasco de cultivo, enquanto os monócitos serão cultivados por no mínimo sete dias para sua diferenciação em macrófagos."

Esta afirmação também está correta. O comportamento diferencial dos monócitos e linfócitos em cultura é conhecido. Os monócitos têm a capacidade de aderir a superfícies plásticas, enquanto os linfócitos permanecem em suspensão. Após a adesão, os monócitos podem ser cultivados para se diferenciarem em macrófagos, um processo que usualmente leva cerca de sete dias.

Portanto, a alternativa correta é a letra E, pois todas as afirmativas estão corretas.

Essa questão testa o entendimento sobre técnicas básicas de laboratório para a separação e cultivo de células sanguíneas, um conhecimento essencial em pesquisas hematológicas e imunológicas.

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