A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é uma técnica fundam...

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Q3510841 Veterinária
A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é uma técnica fundamental no campo da biotecnologia e da biologia molecular. Ela permite amplificar uma região específica do DNA, tornando-a mais acessível para análises detalhadas. Com base nesse contexto, assinale a alternativa correta.
Alternativas

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Gabarito: A

Fundamento decisivo: O critério decisivo é o ciclo térmico clássico da PCR convencional: desnaturação em alta temperatura, anelamento dos primers em temperatura mais baixa e extensão pela Taq DNA polimerase tipicamente em torno de 72 °C. Como a questão confronta exatamente etapas, temperaturas e função da Taq, a alternativa correta é a que associa a síntese de DNA a 72 °C.

Tema central: Etapas da PCR
Análise das alternativas
A
Certa
A alternativa A está correta porque identifica adequadamente a fase de extensão da PCR. Na técnica clássica, a Taq DNA polimerase realiza a síntese da nova fita em torno de 72 °C, temperatura usada como referência para sua atuação ótima no ciclo de amplificação. Esse é o dado técnico central da questão.
B
Errada
Está errada porque a PCR não é limitada a fragmentos de até 100 pares de bases. Essa afirmação cria uma restrição absoluta que não corresponde à capacidade técnica da PCR, que pode amplificar fragmentos maiores, dependendo da enzima, do desenho experimental e das condições da reação.
C
Errada
Está errada porque desloca a atuação dos primers para a etapa errada. Os primers realmente são oligonucleotídeos complementares ao DNA alvo, mas sua hibridização ocorre no anelamento, não na desnaturação. Na desnaturação, o que ocorre é a separação das duas fitas de DNA por alta temperatura.
D
Errada
Está errada porque interpreta de modo incorreto a termoestabilidade da Taq. O fato de a enzima suportar altas temperaturas não significa que ela dispense temperatura elevada no processo nem que seja adequada para todas as etapas por esse motivo. A PCR exige temperaturas diferentes para desnaturação, anelamento e extensão, e a síntese pela Taq ocorre após ajuste térmico apropriado.
E
Errada
Está errada porque inverte a lógica térmica da desnaturação. A separação das fitas da dupla hélice exige alta temperatura, tipicamente na faixa de 94-98 °C, e não temperatura baixa como 30 °C. Em 30 °C não se promove a desnaturação adequada do DNA para o ciclo da PCR.
Pegadinha da questão
A banca misturou conceitos parcialmente verdadeiros com a etapa errada do ciclo: em C, os primers estão corretamente definidos, mas foram colocados na desnaturação; em D, a termoestabilidade da Taq foi usada para sugerir falsamente independência de altas temperaturas.
Dica para questões semelhantes
  • Cheque primeiro se a alternativa respeita a sequência básica da PCR: desnaturação, anelamento e extensão.
  • Associe 72 °C à extensão pela Taq DNA polimerase na PCR convencional.
  • Se a alternativa colocar primer atuando na desnaturação, elimine: primer hibridiza no anelamento.
  • Desnaturação do DNA exige alta temperatura; alternativas com temperatura baixa nessa etapa devem ser descartadas.

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