O preparo correto do meio de cultura, das condições de incub...
Durante a rotina em um laboratório de cultivo celular, um técnico observa que a taxa de crescimento celular reduziu acentuadamente após várias passagens de uma cultura da linhagem HEK 293T, com a morfologia alterada.
Quais ações deveriam ser tomadas pelo técnico para investigar e resolver os problemas descritos?
Gabarito comentado
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Gabarito Comentado: Alternativa D
O tema central desta questão é a manutenção adequada de culturas celulares e os procedimentos para identificar e resolver problemas comuns, como a redução na taxa de crescimento celular. Este é um tópico crucial em microbiologia e em técnicas de laboratório, pois culturas celulares são amplamente utilizadas em pesquisa biomédica, desenvolvimento de medicamentos e outras áreas científicas.
Durante o cultivo celular, é essencial garantir que as condições sejam ótimas para o crescimento e manutenção das células. Quando a taxa de crescimento é reduzida e a morfologia celular é alterada, pode indicar sinais de estresse ou contaminação.
Justificativa da Alternativa Correta (D): A verificação de contaminação é uma das primeiras e mais importantes ações a serem tomadas em situações onde há alterações no crescimento e morfologia das células. Contaminações por bactérias, fungos ou micoplasmas podem alterar significativamente o ambiente do meio de cultura, prejudicando o crescimento celular.
Realizar exames microscópicos e testes específicos é essencial para identificar qualquer tipo de contaminação. Este procedimento pode incluir o uso de corantes específicos que revelam a presença de micoplasmas ou o cultivo em meios seletivos para identificar contaminações bacterianas ou fúngicas.
Análise das Alternativas Incorretas:
A: Diminuir a frequência de subculturas e permitir 100% de confluência pode levar ao estresse celular devido à superlotação, ao invés de resolver o problema. Manter as células em confluência completa por muito tempo pode esgotar os nutrientes e acumular produtos de excreção tóxicos.
B: Ajustar a concentração de CO₂ para 95% é inviável e prejudicial. As concentrações usuais de CO₂ em incubadoras são em torno de 5%, necessárias para manter o pH do meio de cultura estável. Uma concentração tão alta seria letal para a maioria das células.
C: Aumentar a quantidade de tripsina pode resultar em dano celular, pois a tripsina é uma enzima proteolítica que pode destruir proteínas de superfície celular essenciais se utilizada em excesso. Isso não resolveria o problema de alterações morfológicas.
Para interpretar questões como esta, é importante focar nos sintomas apresentados (redução do crescimento e alteração na morfologia) e nas ações adequadas para investigar causas comuns, como a contaminação.
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