a confirmação da presença de coliformes totais é feita por meio da inoculação das colônias suspeitas em caldo verde brilhante bile 5% lactose e posterior incubação a 39ºC ± 1ºC.

a inoculação das colônias suspeitas em caldo EC e posterior incubação em temperatura seletiva de 45ºC ± 0,2ºC, em banho-maria com agitação ou circulação de água é feita para a confirmação da presença de coliformes termotolerantes. 

o cálculo final das contagens de coliformes totais e termotolerantes deve ser realizado de acordo com o estabelecido na ISO específica e o resultado expresso em UFC/kg ou L.

o ágar cristal violeta vermelho neutro bile apresenta em sua composição sais biliares e cristal violeta, responsáveis pela inibição de microrganismos Gram negativos. 

o caldo verde brilhante bile 5% lactose apresenta em sua composição bile bovina e um corante derivado do trifenilmetano (verde brilhante) responsáveis pela inibição de microrganismos Gram negativos.