Questões de Concurso Público UFRJ 2016 para Biólogo - Biologia Molecular

Illumina (Solexa), 454 (Roche) e Ion Torrent (Próton/PGM) são sequenciadores de nova geração que realizam o sequenciamento direto tanto de DNA quanto de RNA.

Uma das maiores vantagens das tecnologias de sequenciamento de nova geração é o fato de que as sequências obtidas geralmente são longas, contendo, ao menos, 1 kilobases.

Apesar dos inúmeros avanços gerados pelas técnicas de sequenciamento de nova geração, ainda é tecnicamente impossível utilizá-las para analisar os genes que estão sendo expressos em um determinado tecido ou condição.

Uma das restrições ao uso do sequenciamento de nova geração é a necessidade de serem utilizadas amostras grandes com alta concentração de ácidos nucleicos.  

as tecnologias recentes de sequenciamento de ácidos nucleicos permitem sequenciar tanto DNA como RNA de forma mais rápida e barata do que anteriormente era conseguido com o sequenciamento de Sanger e, por conta disto, estão revolucionando os estudos de genomas e a biologia molecular.

A PCR em duas etapas ou nested PCR consiste na utilização de dois pares de iniciadores na mesma reação para aumentar a sensibilidade da reação.

A PCR inverso é utilizado para amplificar fragmentos de DNA linear através de PCR, no qual apenas a sequência de um fragmento interno desta sequência é conhecida.

A PCR de fusão consiste na fusão de sequências de DNA conhecidas através de PCR, no qual alguns iniciadores devem ter homologia de bases entre si.

A PCR tradicional consiste de dois iniciadores com sentidos opostos que se anelam na mesma fita simples de DNA, promovendo a amplificação do fragmento localizado entre eles. 

Na PCR multiplex, pares de iniciadores diferentes são utilizados para amplificação de alvos distintos, em amostras diferentes.