Para o diagnóstico molecular da Distrofia Muscular de Duchenne, em que cerca de 65-70% dos casos são causados por deleções de um ou mais éxons no gene DMD, a estratégia laboratorial inicial mais custo-efetiva e sensível para detectar estas variações de número de cópias (CNVs) é o(a)

Homem, 41 anos, apresenta crises convulsivas há 6 meses. RM evidencia lesão cortical-subcortical frontal, infiltrativa, com calcificações e discreta captação heterogênea. Foi realizada biópsia.
Microscopia: neoplasia glial difusa com células monomórficas com halo perinuclear, rede capilar delicada em padrão “chicken-wire”, calcificações focais, ausência de necrose. O estudo imuno-histoquímico mostrou positividade para GFAP, OLIG2, ATRX e IDH1 R132H: positivo difuso. P53 com raras células positivas.
Estudo molecular: 1p/19q: codeleção detectada e TERT promotor: mutação detectada.
Com base nos critérios atuais da OMS para o diagnóstico de oligodendroglioma, assinale a afirmativa correta.

Atualmente, o estudo molecular é de grande valor muitas vezes para o diagnóstico e tratamento de várias neoplasias malignas. Os fatores pré-analíticos são de grande importância na produção de um laudo correto.
Assinale o fator que mais influencia nesse processo. 

A produção de biofármacos utiliza tecnologias de DNA (Ácido Desoxirribonucleico) recombinante para expressão em sistemas celulares. Assim, analise as afirmativas a seguir:

I. Os plasmídeos são vetores extracromossomais de DNA circular que permitem a clonagem de genes de interesse em bactérias como Escherichia coli.

II. A técnica de Western Blotting é utilizada para a detecção e quantificação específica de sequências de RNA (Ácido Ribonucleico) mensageiro.

III. Enzimas de restrição do tipo II realizam cortes em sequências específicas, produzindo extremidades coesas (sticky) ou cegas (blunt).

IV. A tecnologia de anticorpos monoclonais baseia-se na fusão de linfócitos B com células de mieloma para a formação de hibridomas produtores.

Assinale a alternativa que apresenta somente as proposições CORRETAS: 

O aconselhamento genético e o diagnóstico molecular baseiam-se na compreensão dos padrões de herança e variações genômicas. Assim, analise as afirmativas a seguir:

I. A Herança Autossômica Dominante caracteriza-se pela transmissão vertical, onde indivíduos afetados possuem 50% de chance de ter prole afetada.

II. A Heterogeneidade de Locus ocorre quando mutações em diferentes genes podem resultar em um mesmo fenótipo clínico ou doença.

III. A Penetrância Incompleta refere-se à variação na intensidade do quadro clínico entre indivíduos que possuem o mesmo genótipo patogênico.

IV. Doenças Mitocondriais são transmitidas exclusivamente pela linhagem materna, afetando ambos os sexos em uma mesma genealogia.

Assinale a alternativa que apresenta somente as proposições CORRETAS: 

O transporte ativo de íons através da membrana celular caracteriza-se por:

As Enzimas de Restrição (Endonucleases de Restrição) são ferramentas fundamentais para o mapeamento genético e a clonagem molecular, reconhecendo sequências palindrômicas específicas no Ácido Desoxirribonucleico (DNA). Acerca do sistema de restrição-modificação e das características dessas enzimas, registre V, para as afirmativas verdadeiras, e F, para as falsas:

(__) As enzimas de restrição do Tipo II são as mais utilizadas em biologia molecular comercial, pois clivam o Ácido Desoxirribonucleico (DNA) em locais específicos dentro ou muito próximos à sua sequência de reconhecimento.

(__) Isosquizômeros (Isoschizomers) são enzimas de restrição isoladas de diferentes espécies bacterianas que reconhecem a mesma sequência de bases, mas que podem clivar o Ácido Desoxirribonucleico (DNA) em pontos distintos.

(__) A atividade de Estrela (Star Activity) de uma enzima de restrição refere-se à perda de especificidade de clivagem sob condições não ideais, como baixa força iônica ou alta concentração de glicerol no meio reacional.

(__) As bactérias protegem seu próprio Ácido Desoxirribonucleico (DNA) da ação das endonucleases endógenas por meio da Metilação de resíduos de adenina ou citosina nas sequências de reconhecimento específicas.

Após análise, assinale a alternativa que apresenta a sequência correta dos itens acima, de cima para baixo: 

Sobre a Técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), marque a opção correta.

No diagnóstico molecular de infecções virais, a técnica que permite detecção e quantificação simultânea de múltiplos patógenos em uma única reação é:

A PCR em Tempo Real permite a quantificação de ácidos nucleicos através do monitoramento da fluorescência a cada ciclo. Analise as afirmativas a seguir sobre os conceitos de Ct (Cycle Threshold) e sondas TaqMan:

I. O valor de Ct é inversamente proporcional à quantidade inicial de DNA alvo na amostra; quanto menor o Ct, maior a concentração de partida.
II. As sondas TaqMan utilizam a atividade exonuclease 5' - > 3' da Taq DNA polimerase para clivar a sonda hibridizada, separando o fluoróforo repórter do quencher e gerando sinal.
III. O uso de corantes intercalantes como SYBR Green confere maior especificidade que as sondas TaqMan, pois eles se ligam apenas à sequência alvo específica, ignorando dímeros de primers.

Está correto o que se afirma em: 

Na biologia molecular, a fluorimetria é amplamente utilizada para a quantificação de ácidos nucleicos devido à sua alta sensibilidade. O princípio de funcionamento dessa técnica é a seguinte:

A biotecnologia tem auxiliado na busca por novas terapias de diversas formas de acordo com a amplitude de pesquisas que abrange. A imunização ativa, no tratamento do câncer, envolve a

A Biologia Molecular vem aprimorando o diagnóstico laboratorial de doenças infecciosas nos últimos anos. Anteriormente, com a PCR convencional, o dado era qualitativo, com ausência ou presença do material genético do microrganismo pesquisado. Com as inovações trazidas pelo PCR Real Time (qPCR), pode-se obter um dado quantitativo, através do parâmetro Cicle Threshold (Ct). Qual a relação existente entre o valor de Ct e a quantidade de material genético presente na amostra?

As amostras submetidas à técnica de qPCR (PCR quantitativo) necessitam passar por uma fase de preparo prévio, chamada de Extração e purificação de material genético. Essa fase garante a lise das membranas para liberação do material genético, e sua posterior purificação, eliminando contaminantes que podem confundir os resultados. Sobre a extração de material genético, qual alternativa traz uma afirmação falsa?

Em um surto de arboviroses, idosos com comorbidades apresentam sintomas como febre, dor articular e manifestações neurológicas discretas. Considerando os métodos laboratoriais para diagnóstico de dengue, zika e chikungunya, qual é a abordagem mais sensível na fase aguda da infecção? 

A doença de Parkinson pode apresentar formas genéticas e esporádicas. Estudos moleculares nas últimas décadas permitiram identificar múltiplas mutações associadas ao desenvolvimento do parkinsonismo familiar. Entre os genes mais relevantes, destacam-se SNCA (PARK1 e PARK4), PRKN (PARK2), PINK1 (PARK6) e LRRK2 (PARK8). Considerando as características genéticas e fisiopatológicas desses genes, assinale a alternativa correta. 

A carcinogênese é um processo no qual o acúmulo de alterações genéticas leva à transformação maligna da célula. Uma mutação pontual é um tipo de alteração genética que possui um significado biológico específico no contexto dos genes de câncer. A definição de mutação pontual e sua implicação funcional mais comum em um proto-oncogene podem ser definidas como:

A atividade de Cas9 exige motivo PAM e pareamento com o gRNA, gerando quebras duplas (DSBs) reparadas por NHEJ ou HDR. Estudos de Jinek et al., 2012; Doudna & Charpentier, 2014; Tsai & Joung, 2016 discutem janelas de tolerância a mismatches e viés por NHEJ em somáticas. Qual assertiva permanece correta?

O exercício de alta intensidade e curta duração ativa o sistema nervoso simpático, liberando catecolaminas que modulam glicogenólise, glicólise anaeróbia e lipólise. Nelson & Cox (2023) e Brooks, Fahey & Baldwin (2019) ressaltam que a limitação de oxigênio desloca o metabolismo para a produção rápida de ATP via fermentação lática, com lactato sendo exportado para o ciclo de Cori. Nesse cenário, qual proposição reflete de forma mais precisa a regulação metabólica muscular?

A glicólise e a gliconeogênese hepática não se configuram como vias isoladas, mas como fluxos reciprocamente regulados em nível alostérico, covalente e hormonal. A literatura (Nelson & Cox, 2023) enfatiza que o ponto de bifurcação crítico é a atividade da fosfofrutoquinase-1 (PFK-1) e da frutose-1,6- bisfosfatase (FBPase-1), ambas moduladas pelo nível intracelular de frutose-2,6-bisfosfato (F2,6BP). Sob predomínio do glucagon, há ativação da proteína quinase A (PKA) e fosforilação da PFK-2/FBPase-2. Considerando esses elementos, qual proposição traduz de maneira mais acurada o efeito metabólico no hepatócito em jejum?