essas podem incluir, por exemplo, EST, microarranjo e RNA-seq.

ainda não existe aplicação ou uso do PCR em tempo real nesse tipo de análise.

geralmente essas análises geram uma lista com alguns poucos genes diferencialmente expressos.

a interpretação biológica a partir de uma lista de genes diferencialmente expressos pode ser resolvida de maneira simples.

até o presente momento, não existe ainda nenhuma ferramenta de bioinformática já desenvolvida para inferir na função biológica dos genes de interesse.

Microarranjo de DNA: método de sequenciamento de cDNA de alto desempenho baseado no sequenciamento de transcritos.

Bibliotecas de EST: é o método de sequenciamento de cDNA de alto desempenho, baseado no sequenciamento direto de transcritos.

RNA – seq: são sequências ou etiquetas (tags) de leitura simples produzidas a partir do sequenciamento parcial de uma biblioteca de cDNA.

Análise serial da expressão gênica (SAGE): consiste em um arranjo de moléculas de DNA de fita simples, denominadas sondas, quimicamente ligadas a uma superfície sólida, os “chips”.

Hibridização subtrativa supressiva (SSH): consiste na hidrização de uma amostra de cDNA de interesse (tester) com um excesso de cDNA fita simples de outra amostra contrastante (driver).

o transcriptoma é o mesmo em todos tecidos e órgãos.

vários transcriptomas podem haver em um único organismo.

independente de estágio de desenvolvimento, o transcriptoma é o mesmo.

a transcriptômica estuda o RNA mensageiro (mRNA) apenas, o que exclui RNA não codificante (ncRNA).

apesar de sua aplicação em diversos campos da biologia, a transcriptômica não pode ser pesquisada através de técnicas de alto desempenho (high throughput) e sequenciamento de nova geração (NGS).

Em células bacterianas, um gene regulador ajuda a controlar a transcrição do óperon.

Em células bacterianas, o DNA deve desenrolar-se parcialmente das proteínas histona para que possa haver transcrição.

Os genes regulatórios codificam proteínas usadas no metabolismo ou na biossíntese ou que tem papel estrutural na célula.

A maioria dos genes eucarióticos é organizada em óperons e frequentemente é transcrita em uma única molécula de mRNA.

Os genes constitutivos são aqueles cujos produtos – RNA ou proteínas – interagem com outras sequências e afetam a transcrição ou a tradução dessas sequências.

Quantifica somente a concentração de anticorpos.

No elisa tipo sanduiche são utilizados dois anticorpos diferentes.

Em geral, a curva padrão é feita com concentrações crescentes e conhecidas da enzima ligadora de antígeno.

Amostras de tecidos devem ser inicialmente centrifugadas e o sobrenadante, contendo as células, estocado para análise.

Neste método, uma enzima incolor, que reage com um substrato colorido para produzir um produto, é covalentemente ligada a um anticorpo específico que reconhece o antígeno alvo.

C = absorbância da substância x Absorbância do padrão.

C = absorbância da substância x Fator de calibração.

C = absorbância da padrão x Transmitância da amostra.

C = absorbância da substância x Transmitância do padrão.

C = Log da absorbância da substância x Fator de calibração.

ELISA.

Fotometria.

Fluorometria.

Espectrofotometria.

Imunohistoquímica.

O camundongo BALB/c é geneticamente modificado.

Os animais heterogênicos possuem altíssimo grau de consanguinidade.

A produção do camundongo C57BL/6 ocorre pelo cruzamento desta espécie em sucessivas gerações entre irmãos.

A manutenção do rato Wistar é mais onerosa do que a do camundongo Swiss, pois esta linhagem de rato é heterogênea.

Os animais isogênicos são sempre mais robustos, com maior fertilidade, maior número de filhotes por ninhada e menos suscetíveis à doenças.

pH

pKa

pKb

[H ⁺ ]

pOH