Os fixadores glutaraldeído e Karnovsky (glutaraldeído + paraformaldeído) são os melhores fixadores primários utilizados na Microscopia Eletrônica de Varredura, uma vez que outros fixadores comumente utilizados em microscopia de luz, como a formalina, ocasionam grandes artefatos às células e aos tecidos quando examinados ao microscópio eletrônico.

Isso se deve ao fato de:

Em relação à preparação de amostras biológicas a serem analisadas no microscópio eletrônico de varredura, quais os passos de processamento, em sequência cronológica, são comumente realizados nos laboratórios?

O sistema de microdissecção a laser compreende vários componentes, incluindo microscópio, laser (ultravioleta ou infravermelho), módulo para posicionamento e coleta de amostras e software para visualização de imagens e controle dos processos. Esse tipo de equipamento é comercializado por diferentes fabricantes que podem empregar algumas especificidades no sistema. Em relação a essa temática, é inadequado afirmar que: 

Em uma determinada abordagem experimental envolvendo xenoenxerto, células endoteliais foram inoculadas juntamente com células tumorais em camundongos nude, ou seja, animais imunossuprimidos. Dois grupos experimentais foram utilizados (grupo controle que recebeu apenas salina e grupo tratado que recebeu um fármaco com atividade antiangiogênica). Após 30 dias, os animais foram eutanasiados, e o tumor foi coletado e processado para cortes histológicos com espessura de 10 micrometros. Na sequência, áreas específicas do corte, contendo apenas células endoteliais, foram coletadas para posterior análise de expressão gênica.

Esse tipo de análise é possível empregando que tipo de microscopia?

O ImageJ/FIJI é um software de domínio público que foi desenvolvido pelo National Institute of Health (NIH), o qual tem sido amplamente utilizado pela comunidade científica porque permite a realização de diferentes tipos de análises.

Em relação às potencialidades do ImageJ no processamento de imagens obtidas por microscopia confocal de varredura a laser, o referido software não permite: 

Os centros de microscopia, em geral, contêm vários equipamentos de alto valor agregado e são de caráter multiusuário. Assim sendo, há uma alta demanda para o uso desses equipamentos. As imagens geradas por microscopia confocal de varredura a laser são armazenadas em arquivos com a extensão do programa de aquisição. No caso do software Nis-elements, os arquivos possuem a extensão nd2.

Qual seria a melhor opção para realizar as análises quantitativa e qualitativa após a aquisição das imagens de microscopia confocal?

O sistema de microscopia confocal de varredura a laser contém vários componentes, incluindo i) conjunto de lasers, ii) unidade de varredura com componentes ópticos e eletrônicos, e iii) sistema computacional. O software utilizado para a aquisição de imagens varia de acordo com o fabricante, entretanto ele contém os requisitos básicos para aquisição, processamento, análise e visualização das imagens.

Considerando as funcionalidades do software Nis-elements, não é adequado afirmar que:

Considerando os princípios básicos de funcionamento da microscopia fotônica, vários sistemas especiais de microscopia foram sendo desenvolvidos ao longo do tempo para aprimorar as formas de observação. Os primeiros modelos comerciais de microscópio confocal foram lançados no século passado (início da década de 80). A partir disso, o interesse pela utilização do microscópio confocal de varredura a laser (MCVL) aumentou consideravelmente.

Qual seria a principal funcionalidade do MCVL, responsável por atrair o interesse de pesquisadores das áreas de Ciências Biológicas e Biomédicas?

Qual técnica é utilizada para determinar a orientação cristalina de uma amostra através da difração de elétrons na microscopia eletrônica de varredura?

Considere as seguintes condições: A amostra é posicionada em um ângulo de 70° a 80° em relação ao feixe de elétrons, e as figuras de difração são capturadas por uma câmara CCD conectada a uma tela de fósforo.

Durante a análise de uma amostra em um microscópio eletrônico de varredura (SEM), o controle do ambiente de vácuo na câmara é fundamental.

Qual é a principal razão para manter um ambiente de vácuo controlado durante o processo de análise?

A resolução de imagem em um microscópio eletrônico de varredura (MEV) é um aspecto fundamental que determina a qualidade e o nível de detalhe das imagens obtidas. Essa resolução refere-se à capacidade do instrumento de discernir entre dois pontos próximos, permitindo a visualização de estruturas em escala nanométrica. A escolha dos parâmetros operacionais e das configurações do equipamento pode afetar a definição e o contraste das imagens obtidas. Uma boa resolução é crucial para a identificação precisa de características superficiais e para a análise de defeitos e heterogeneidades nos materiais, o que pode ter implicações significativas em pesquisas científicas e em aplicações industriais.

Analise as afirmações abaixo:

I. O tamanho do spot do feixe é um fator crítico que influencia a resolução da imagem em um microscópio eletrônico de varredura (SEM). Um spot menor resulta em maior detalhamento, melhorando assim a resolução.

II. A tensão de aceleração do feixe de elétrons é um parâmetro significativo, pois determina a energia dos elétrons. Isso afeta tanto a penetração na amostra quanto a resolução da imagem obtida.

III. O tipo de detector utilizado no SEM impacta a resolução da imagem. Diferentes detectores possuem capacidades variadas em relação à coleta de elétrons, o que influencia a qualidade final da imagem.

IV. O tipo de material da amostra pode influenciar a resolução da imagem. Quanto menor o número atômico menor o poder de penetração dos elétrons, melhor resolução é obtida com elétrons secundários.

Em relação aos parâmetros que afetam a resolução de imagem em um SEM, está correto o que se afirma em:

Profissionais de caracterização de materiais precisam escolher o microscópio adequado para análises morfológicas, uma habilidade essencial em diversas áreas científicas e industriais. Um pesquisador analisou a morfologia da superfície de uma cerâmica utilizando um microscópio com detector de elétrons que são emitidos da superfície da amostra quando ela é bombardeada por um feixe de elétrons primários.

Os elétrons são os principais responsáveis pela formação da imagem topográfica. Eles proporcionam alto contraste, realçando a textura e os detalhes da superfície da amostra, como rugosidades e variações na altura.

Qual tipo de microscópio foi utilizado considerando as características do elétron analisado?

A saúde humana depende de uma sistemática de fatores relacionados com o funcionamento do organismo humano. Um dos exames que auxilia o diagnóstico da maioria das doenças é o exame de sangue, em que é possível comparar os índices obtidos com a contagem diferencial. Assim, complete com o termo correspondente:

__________________ normalmente auxiliam no controle de reações inflamatórias e alérgicas. Os valores de referências podem variar discretamente entre diferentes laboratórios, ficando entre 0,5% - 1,0%.

Em relação às regras múltiplas de Westgard associadas ao gráfico de Levey-Jennings, para avaliação de controle de qualidade, fazem parte dessas regras: 

A RDC 302/2005 já se encontra revogada, sendo substituída pela RDC 768/2023. Sobre a gestão da qualidade, mais especificamente sobre o controle de qualidade laboratorial, segundo a RDC 768/2023, deve garantir-se que:

Na realização da punção venosa para hemocultura, a fim de maximizar a sensibilidade de detecção, considera-se fundamental

As tiras testes com população microbiana de Geobacillus stearothermophilus são utilizadas como testes para controle de qualidade de

Leia o caso a seguir.

Em um caso suspeito de meningite, durante a realização do exame citológico de LCR foi contabilizada a presença de 300 leucócitos por microlitro de LCR (VR: 0 - 5 Leucócitos/microlitro). Na análise diferencial dos leucócitos foram contabilizados 99% de mononucleares e 1% de polimorfonucleares (neutrófilos). Ausência de estruturas coradas pela tinta da China. A quantidade de proteínas era de 40 g/dL (VR: 15 - 45 g/dL). A glicose de 65% em relação ao valor sérico (VR: 50 a 70%).

Os dados sumarizados apontam para uma meningite possivelmente de ordem

Leia o caso clínico a seguir.

Para a realização de um ensaio de hemaglutinação indireta para chagas, foi utilizada a metodologia semiquantitativa de determinação. Para isso, foram utilizados a amostra do cliente a ser testado (soro), uma placa de microtitulação e os reagentes fornecidos pelo fabricante, hemácias impregnadas com antígeno de Tripanossoma cruzi, tampão diluente e amostras controle negativo e positivo. Ainda seguindo as instruções do fabricante, em um tubo de ensaio, foram pipetados 310 microlitros de diluente e, em seguida, 10 microlitros de amostra (soro) do cliente. Em seguida, depois de devidamente homogeneizados o soro e o diluente, e com a placa devidamente pronta para uso, de acordo com as orientações do fabricante, foram colocados 50 microlitros da amostra diluída (tubo de ensaio) na terceira cavidade da placa de microtitulação. Na primeira cavidade foram colocados 50 microlitros de amostra controle positiva (pronta para uso) e na segunda cavidade, 50 microlitros de amostra controle negativa (pronta para uso). Na quarta, quinta, sexta, sétima, oitava, nona, décima, décima primeira e décima segunda cavidade foram colocados, em cada uma, 50 microlitros de solução diluente. Em seguida, 50 microlitros da amostra diluída (tubo de ensaio) foi também colocada na quarta cavidade, seguido de uma homogeneização com o diluente previamente colocado na cavidade. Feito isso, 50 microlitros da amostra da cavidade 4 foi transferida para a cavidade 5 e devidamente homogeneizada. Depois, 50 microlitros da amostra da cavidade 5 foi transferida para a cavidade 6, seguido de homogeneização. Todo o processo descrito para as cavidades 4, 5 e 6 foi repetido nas demais, até a décima segunda cavidade da placa. Em seguida, conforme orientado pelo fabricante, foram colocados 25 microlitros de hemácias sensibilizadas em cada cavidade, da primeira à décima segunda. A placa foi, em seguida, homogeneizada em agitador de placa por 4 minutos, depois, mantida em repouso por 2 horas, para, em seguida proceder-se a leitura de resultados. A aglutinação da reação foi observada nas cavidades 1, 3, 4, 5, 6 e 7. Considerada indeterminada na cavidade 8 e não aglutinada nas cavidades 2, 9, 10, 11 e 12.

A titulação a ser laudada no caso descrito é:

Várias são as técnicas de diagnóstico para a doença de Chagas em função da dinâmica de distribuição do parasito no ciclo de vida parasitário. Destacam-se o emprego de técnicas parasitológicas e sorológicas de detecção em diferentes momentos da doença. São exemplos de técnicas diagnósticas sorológicas