Questões da Prova COSEAC - 2015 - UFF - Técnico de Laboratório/Área: Microscopia Eletrônica

A citoquímica estrutural permite a localização in situ da atividade enzimática. No entanto, estabelecer protocolos de fixação que permitam a preservação das estruturas celulares e a atividade catalítica é um desafio da técnica. São comuns os falsos resultados, nas reações para detecção da atividade de enzimas glicolíticas. Isto ocorre pelo deslocamento por difusão, em tecidos não fixados, da enzima ou do produto da reação em relação ao seu sítio de atividade. A fim de evitar estes artefatos técnicos, recomenda-se adicionar ao meio de incubação para revelar a enzima a seguinte solução:

A resina acrílica LRWhite, que, devido a sua natureza hidrofílica, é permeável aos anticorpos utilizados para imunocitoquímica ultraestrutural, pode ser polimerizada sem acréscimo de catalizador, na seguinte condição:

Observe as afirmativas a seguir, em relação à técnica de imunocitoquímica ultraestrural, e avalie se são verdadeiras (V) ou falsas (F).

I - A técnica de “immunogold” é muito precisa e permite detecção e localização in situ da molécula alvo, além de possibilitar dupla marcação.

II - Anticorpos secundários acoplados a partículas de ouro coloidal podem ser usados para análise por microscopia de luz ou eletrônica.

III - O uso de resinas acrílicas e grades de níquel são recomendados para as reações pós-inclusão; além disto, a pós-fixação com tetróxido de ósmio deve ser evitada.

IV - Para detectar antígenos de superfície a técnica de pré-inclusão é a mais indicada.

De cima para baixo, a sequência correta é:

Alcançar a máxima preservação ultraestrutural é objetivo do processamento para microscopia eletrônica. No entanto, a fixação pode interferir na possibilidade de marcação pela técnica de imunocitoquímica ultraestrutural, e, em geral, isto se deve ao emprego da combinação de aldeídos fórmicos e glutáricos. É correto afirmar que, além das lavagens adequadas, podem-se retirar radicais aldeídicos livres pelo uso da solução:

A técnica do ácido fosfotúngstico (PTA) é uma técnica utilizada em microscopia eletrônica de transmissão para detectar: