Rios de Classe 2 são aqueles para os quais se faz necessário tratamento avançado para disponibilizar água para a população.

Rios de Classe 2 requerem que a DBO 5 dias a 20 °C até 5 mg/L O₂ e OD, em qualquer amostra, não seja inferior a 5 mg/L O₂.

Rios de Classe 2 podem ter densidade de cianobactérias de até 50000 cel/mL ou 5 mm³/L.

Em rios que servem de manancial para o abastecimento urbano, coliformes termotolerantes não podem exceder um limite de 1.000 por 100 mililitros em 80% ou mais das amostras coletadas.