O conhecimento sobre os biofilmes tem sido adquirido pelas observações microscópicas e por análises bioquímicas e taxonômicas destrutivas que, em geral, alteram a sua estrutura. A microscopia de luz, no entanto, é uma metodologia que pode fornecer informações sobre a extensão e a espessura de uma superfície colonizada, distribuição dos microrganismos e sua atividade fisiológica, entre outras.

A figura a seguir mostra, por microscopia óptica confocal de varredura a laser, uma visão tridimensional de um biofilme, formado após 72 h de incubação do corpo de prova com inóculo de bactérias redutoras de sulfato mesófilas gram-negativas (m-BRS), obtida pelo somatório de cortes ópticos sequenciais de 1 μm de profundidade. Essa análise permitiu estimar em aproximadamente 30 μm a espessura do biofilme aderido sobre a superfície do metal. 






O microscópio óptico confocal de varredura a laser representa um grande avanço na instrumentação microscópica com potencial para estudo de biofilmes bacterianos. Com relação os princípios, fundamentos e uso dessa modalidade de microscopia óptica, assinale a afirmativa incorreta.

A microscopia eletrônica trouxe um grande avanço para a Microbiologia, ela é uma técnica muito utilizada nos estudos dos biofilmes. Devido ao seu alto poder de resolução, de cerca de 0,2 nm, é possível obter informações detalhadas sobre a distribuição e ultraestrutura das células. A figura a seguir mostra o aspecto em microscopia eletrônica de transmissão (MET) e análise elemental do biofilme pré-formado de 90 dias, após 4 (A) e 24 h (B), respectivamente, sobre os corpos de prova imersos em água corrente desaerada sob condições estáticas de fluxo d'água.







Com relação à metodologia, aplicação e imagens fornecidas pela técnica da MET, é correto afirmar que

O microscópio eletrônico apresenta um poder de resolução potencialmente superior ao do microscópio de luz, atingindo valores inferiores a 1 nanômetro. Nesse sentido, o uso da microscopia eletrônica favorece realizar a correlação das suas imagens, aprofundando o estudo de biofilmes e da biocorrosão.

O aço inoxidável, embora seja um metal resistente a biocorrosão, é susceptível a formação de biofilme. A deposição de biofilme sobre a superfície do aço inoxidável ocorre porque ele possui uma superfície homogênea coberta de óxido e livre de produtos de corrosão, favorecendo, assim, a aderência microbiana ao metal. Após algumas semanas de exposição do aço inoxidável ao ambiente marinho, sua superfície se encontra recoberta por um biofouling complexo, constituído principalmente por bactérias, material particulado e microrganismo de dimensões maiores como algas, diatomáceas e protozoários. A imagem abaixo mostra, segundo Videla (2003), por microscopia eletrônica, o protozoário Zoothamnium sp. fixado o sobre aço inoxidável logo após a exposição da superfície à água do mar natural (escala: 10 μm).






Através da imagem é possível notar que o aço inoxidável, apesar de ser resistente à corrosão, a atividade metabólica dos microrganismos no interior dos depósitos de biofouling pode influenciar as reações eletroquímicas do processo de corrosão. A correlação dessa imagem com os estudos de biofilmes e da biocorrosão só foi possível a partir de uma metodologia que é revelada pela