Algumas cepas de enterococos podem dar falsa reação negativa na prova da catalase.

O Teste da DNAse consiste na inoculação de colônias em meio contendo DNA, (DNAse test agar). Após a incubação, uma coloração rósea característica ao redor das colônias produtoras de DNAse indica a positividade da prova.

Na prova da catalase, ao coletar a colônia, não carregar meio de cultura (ágar sangue), que pode acarretar resultados falso-negativos porque o sangue do meio contém catalase.

No teste do crescimento em ágar manitol, avalia-se a capacidade de fermentar o manitol em meio contendo 7,5 % de cloreto de sódio. O indicador de pH é o vermelho de fenol, que indica uma reação positiva quando o meio ao redor das colônias permanece avermelhado, e negativa, quando se torna amarelo.

No teste da bacitracina é importante notar que as identificações devem ser feitas em ágar sangue com tensão de CO₂ ou os resultados podem ser conflitantes.

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Não reduzem nitrato a nitrito, mas fermentam a glicose com ou sem produção de gás.

Não crescem em meios básicos (caldo peptona) e meios seletivos (Mac Conkey, EMB - Eosin Methylene Blue Agar).

São bacilos esporulados, com motilidade variável, oxidase e catalase positivos.

São anaeróbios facultativos (crescem em aerobiose e anaerobiose), mas não fermentam a glicose.

O Meio IAL (Instituto Adolfo Lutz) foi elaborado para triagem de enterobactérias e consiste de 9 provas em apenas um tubo de ensaio: indol (tampa), fermentação da sacarose e glicose e produção de gás, fenilalanina, ureia, H2S, lisina e motilidade.

A técnica mais utilizada para semeadura em placa é a técnica de esgotamento, cujo objetivo é o agrupamento de colônias.

Na semeadura, a amostra estriada sobre toda a superfície do ágar em placa dificulta a contagem de colônias.

As placas de meio de cultura semeadas devem ser incubadas por 12 horas em estufa bacteriológica, e se não houver crescimento visível de colônias bacterianas, a incubação pode ser prolongada por apenas mais 24 horas.

A semeadura de quantidade conhecida da amostra com alça calibrada permite fazer a quantificação das bactérias no material.

A observação das características da colônia que se desenvolveu na placa dificilmente permite a identificação do grupo bacteriano.

O exame “a fresco” não permite avaliar a presença de estruturas microbianas com características peculiares e que, em geral, apresentam tamanho suficiente para serem visualizadas sem coloração.

A maioria das estruturas bacterianas é de fácil visualização e diferenciação no exame “a fresco”, não precisando ser submetida a processo de coloração.

No exame direto após coloração, os problemas de interpretação geralmente resultam de má preparação do esfregaço: finos ou espessos, de aquecimento da lâmina e descoloração inadequada.

Materiais obtidos de pacientes sob terapia antibiótica e/ou de culturas velhas não causam alteração da morfologia do organismo.

A observação direta do material não permite determinar a qualidade da amostra e realizar o diagnóstico presuntivo do agente etiológico.

3 a 5ml por frasco (conforme instruções do fabricante), de uma a duas amostras, coletadas com o intervalo de ao menos 4 horas entre elas.

3 a 5ml por frasco (conforme instruções do fabricante), de uma a duas amostras, coletadas com o intervalo de ao menos 8 horas entre elas.

5 a 10ml por frasco (conforme instruções do fabricante), de duas a três amostras, coletadas com o intervalo de ao menos 12 horas entre elas.

5 a 10ml por frasco (conforme instruções do fabricante), de duas a três amostras, coletadas com o intervalo de ao menos um dia entre elas.

5 a 10ml por frasco (conforme instruções do fabricante), de três a quatro amostras, coletadas com o intervalo de ao menos dois dias entre elas.