Questões de Concurso
Sobre aplicação e execução de técnicas bacteriológicas em biomedicina - análises clínicas
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A técnica de membrana filtrante é, amplamente, utilizada nas análises de amostras de água para a detecção de coliformes totais e termotolerantes. Uma determinada amostra de água apresentou 40 colônias com brilho verde metálico no meio ágar mENDOLES. Vinte dessas colônias foram submetidas ao ensaio confirmativo no caldo lauril triptose com púrpura de bromocresol. Das 20 colônias, 18 apresentaram resultado positivo no caldo lactosado verde brilhante bile e 12 apresentaram resultado positivo no caldo EC.
O resultado final, em unidades formadoras de colônia por 100 mL (UFC/100 mL) de coliformes totais e termotolerantes, respectivamente, foi:
Gráfico 7A3AAA

O gráfico 7A3AAA foi elaborado com dados obtidos em
três condições diferentes de crescimento, em que um microrganismo
isolado foi cultivado sem a presença de antimicrobiano;
com a adição do antimicrobiano 1 após nove horas de cultivo; e
com a adição do antimicrobiano 2 após nove horas de cultivo.
As quantidades de células viáveis das culturas puras foram obtidas
a cada hora, entre zero e dezoito horas.
Os métodos representados nas figuras
I. O método original utilizava violeta-de-genciana. Hoje se utiliza outro tipo de cristal violeta, a solução de violetade-metila, que já contém fixador químico. Devido a isso, a fixação do esfregaço em chama caiu em desuso e é atualmente contraindicada.
II. A fucsina fenicada, utilizada como corante secundário por Gram, foi substituída pela safranina, um corante básico insolúvel em água. A safranina mantém-se mais distante da violeta no espectro de cor, diferenciado com maior nitidez as bactérias Gram-negativas, que assumem a cor vermelho-claro.
III. As bactérias que têm a parede celular composta por mureína durante o processo de descoloração do corante primário com álcool etílico, retém o corante. Já as bactérias com parede celular composta predominantemente por ácidos graxos perdem o complexo iodo-pararosanilina, assumindo a cor do corante de fundo.
IV. O controle de qualidade dos corantes e da coloração de Gram deve ser feito com cepas de Streptococcus pyogenes ATCC (Gram-negativa) e de Escherichia coli (Gram-positiva).
Estão CORRETAS as afirmativas:
A semeadura para o cultivo quantitativo de bactérias baseia-se na semeadura de um volume conhecido de material. Numere os procedimentos abaixo na sequência em que a prática de semeadura é realizada:
( ) Observar a integridade da película formada até despontar na parte superior da placa.
( ) Distribuir material em linha reta de uma extremidade a outra.
( ) Obter o volume definido pela técnica com o auxílio da alça calibrada.
( ) Homogeneizar o material com agitação manual ou vórtex.
( ) Perpendicularmente, distribuir novamente o material por toda a superfície.
( ) Repetir o mesmo procedimento por três vezes, até que a superfície da placa esteja seca.
Assinale a alternativa que apresenta a numeração correta, de cima para baixo.