Questões de Concurso
Comentadas sobre aplicação e execução de técnicas bacteriológicas em biomedicina - análises clínicas
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A técnica de membrana filtrante é, amplamente, utilizada nas análises de amostras de água para a detecção de coliformes totais e termotolerantes. Uma determinada amostra de água apresentou 40 colônias com brilho verde metálico no meio ágar mENDOLES. Vinte dessas colônias foram submetidas ao ensaio confirmativo no caldo lauril triptose com púrpura de bromocresol. Das 20 colônias, 18 apresentaram resultado positivo no caldo lactosado verde brilhante bile e 12 apresentaram resultado positivo no caldo EC.
O resultado final, em unidades formadoras de colônia por 100 mL (UFC/100 mL) de coliformes totais e termotolerantes, respectivamente, foi:
I. O método original utilizava violeta-de-genciana. Hoje se utiliza outro tipo de cristal violeta, a solução de violetade-metila, que já contém fixador químico. Devido a isso, a fixação do esfregaço em chama caiu em desuso e é atualmente contraindicada.
II. A fucsina fenicada, utilizada como corante secundário por Gram, foi substituída pela safranina, um corante básico insolúvel em água. A safranina mantém-se mais distante da violeta no espectro de cor, diferenciado com maior nitidez as bactérias Gram-negativas, que assumem a cor vermelho-claro.
III. As bactérias que têm a parede celular composta por mureína durante o processo de descoloração do corante primário com álcool etílico, retém o corante. Já as bactérias com parede celular composta predominantemente por ácidos graxos perdem o complexo iodo-pararosanilina, assumindo a cor do corante de fundo.
IV. O controle de qualidade dos corantes e da coloração de Gram deve ser feito com cepas de Streptococcus pyogenes ATCC (Gram-negativa) e de Escherichia coli (Gram-positiva).
Estão CORRETAS as afirmativas: