O EDTA (ethylenediamine tetra-acetic acid ) é um ácido que tem sido utilizado, com frequência,
para descalcificar tecidos mineralizados que passarão por métodos imuno-histoquímicos.
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A omissão do anticorpo primário, a substituição do anticorpo primário por um soro não imune,
a substituição do anticorpo primário por outro anticorpo dirigido para um antígeno diverso ao
que está em estudo e a inclusão da vimentina no painel representam controles importantes
da reação imuno-histoquímica.
A incubação das lâminas em uma câmara úmida é aconselhável em qualquer temperatura,
pois, se uma lâmina tratada com o anticorpo primário ficar seca, tem-se como resultado uma
coloração de fundo.
Os fixadores coagulantes, como o álcool, e aqueles de ligação cruzada, como o formaldeído,
podem causar alterações na configuração de proteínas, mascarando os determinantes
antigênicos e, consequentemente, afetando a ligação do anticorpo.
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