o código genético é degenerado.

o código genético é comum a todos os seres vivos.

cada organismo apresenta seu próprio código genético.

a técnica permite trocar o código genético do organismo doador do gene.

a técnica permite trocar o código genético do organismo receptor do gene.

essas podem incluir, por exemplo, EST, microarranjo e RNA-seq.

ainda não existe aplicação ou uso do PCR em tempo real nesse tipo de análise.

geralmente essas análises geram uma lista com alguns poucos genes diferencialmente expressos.

a interpretação biológica a partir de uma lista de genes diferencialmente expressos pode ser resolvida de maneira simples.

até o presente momento, não existe ainda nenhuma ferramenta de bioinformática já desenvolvida para inferir na função biológica dos genes de interesse.

Microarranjo de DNA: método de sequenciamento de cDNA de alto desempenho baseado no sequenciamento de transcritos.

Bibliotecas de EST: é o método de sequenciamento de cDNA de alto desempenho, baseado no sequenciamento direto de transcritos.

RNA – seq: são sequências ou etiquetas (tags) de leitura simples produzidas a partir do sequenciamento parcial de uma biblioteca de cDNA.

Análise serial da expressão gênica (SAGE): consiste em um arranjo de moléculas de DNA de fita simples, denominadas sondas, quimicamente ligadas a uma superfície sólida, os “chips”.

Hibridização subtrativa supressiva (SSH): consiste na hidrização de uma amostra de cDNA de interesse (tester) com um excesso de cDNA fita simples de outra amostra contrastante (driver).

o transcriptoma é o mesmo em todos tecidos e órgãos.

vários transcriptomas podem haver em um único organismo.

independente de estágio de desenvolvimento, o transcriptoma é o mesmo.

a transcriptômica estuda o RNA mensageiro (mRNA) apenas, o que exclui RNA não codificante (ncRNA).

apesar de sua aplicação em diversos campos da biologia, a transcriptômica não pode ser pesquisada através de técnicas de alto desempenho (high throughput) e sequenciamento de nova geração (NGS).

uma das etapas prévias ao sequenciamento baseado no método de Sanger é a clonagem.

no método de Sanger, o sequenciamento de DNA se baseia no uso de modificações de bases específicas e reações de clivagem.

a maioria dos sequenciadores automáticos usam o método Sanger de sequenciamento com fragmentos de DNA marcados radioativamente.

nos sequenciadores automáticos em que os fragmentos de DNA são detectados durante eletroforese, a passagem dos fragmentos é registrada por um laser móvel.

apesar de ser, atualmente, uma técnica rotineira, até meados da década de 1970, apenas sequências de 15-20 pares de base haviam sido sequenciadas.

Em células bacterianas, um gene regulador ajuda a controlar a transcrição do óperon.

Em células bacterianas, o DNA deve desenrolar-se parcialmente das proteínas histona para que possa haver transcrição.

Os genes regulatórios codificam proteínas usadas no metabolismo ou na biossíntese ou que tem papel estrutural na célula.

A maioria dos genes eucarióticos é organizada em óperons e frequentemente é transcrita em uma única molécula de mRNA.

Os genes constitutivos são aqueles cujos produtos – RNA ou proteínas – interagem com outras sequências e afetam a transcrição ou a tradução dessas sequências.

quanto a origem das mutações, elas sempre ocorrem em função de uma indução por atividade humana.

quanto ao destino, as mutações são classificadas como somáticas quando envolverem gametas ou zigotos.

quanto ao tamanho da estrutura envolvida, as mutações gênicas referem-se aos casos onde trechos de DNA alterado forem relativamente grandes, quando podem ocorrer quebras de cromossomos.

com relação ao compartimento atingido, as mutações serão citoplasmáticas quando ocorrerem no DNA presente nos cromossomos do núcleo, e nucleares quando ocorrerem no DNA de mitocôndria e cloroplastos.

as mutações gênicas representam a maioria das mutações úteis ao melhoramento genético, pois, nestes casos de simples substituição de bases, a sobrevivência e a fertilidade dos mutantes são muito maiores do que nas mutações cromossômicas.

transformação de amônia a nitrato, representado resumidamente pela fórmula NH3 -> NO2- -> NO3-.

fixação do carbono inorgânico (CO2) e carbono orgânico (glicose), através da quimiossíntese.

quantidade necessária de ácido para titular as bases presentes em uma amostra de água.

oxidação dos aminoácidos pelas células vivas, sejam de tecidos orgânicos ou bactérias.

incorporação de biomassa vegetal pelas bactérias.

marcadores baseados em DNA mitocondrial são inúteis no estabelecimento de relações entre espécies domésticas e seus parentes selvagens.

os marcadores moleculares não são eficientes como ferramenta na investigação da ocorrência de endogamia em plantéis de organismos aquáticos cultivados.

a predição de ganhos genéticos de animais adaptados ao setor produtivo é um exemplo de abordagem onde a genotipagem de marcadores moleculares é ineficiente.

a análise com marcadores é uma estratégia importante na manutenção dos recursos genéticos na fase inicial de domesticação de organismos aquáticos nativos.

os marcadores moleculares são utilizados em aquicultura para analisar a variação genética e identificação de indivíduos mas não se prestam para análise de variações dentro e entre populações.

Peixe

Capivara

Jacaré

Onça

Zooplâncton

O Hamster é a espécie animal com maior período de vida, sendo entre 3 – 8 anos.

Um camundongo nocaute é aquele que através de manipulação genética teve genes acrescentado.

Um camundongo nocaute é aquele que através de manipulação genética teve genes retirados.

A temperatura corporal normal dos pequenos roedores como ratos e camundongos varia em torno de 39 e 40 °C para camundongos e ratos, respectivamente.

Considerando que o número de animais por ninhada é bem maior nos camundongos, estes têm um período de gestação de 21 – 50 dias, superior ao dos ratos que corresponde a 15 – 20 dias.

Quantifica somente a concentração de anticorpos.

No elisa tipo sanduiche são utilizados dois anticorpos diferentes.

Em geral, a curva padrão é feita com concentrações crescentes e conhecidas da enzima ligadora de antígeno.

Amostras de tecidos devem ser inicialmente centrifugadas e o sobrenadante, contendo as células, estocado para análise.

Neste método, uma enzima incolor, que reage com um substrato colorido para produzir um produto, é covalentemente ligada a um anticorpo específico que reconhece o antígeno alvo.

C = absorbância da substância x Absorbância do padrão.

C = absorbância da substância x Fator de calibração.

C = absorbância da padrão x Transmitância da amostra.

C = absorbância da substância x Transmitância do padrão.

C = Log da absorbância da substância x Fator de calibração.

ELISA.

Fotometria.

Fluorometria.

Espectrofotometria.

Imunohistoquímica.

O camundongo BALB/c é geneticamente modificado.

Os animais heterogênicos possuem altíssimo grau de consanguinidade.

A produção do camundongo C57BL/6 ocorre pelo cruzamento desta espécie em sucessivas gerações entre irmãos.

A manutenção do rato Wistar é mais onerosa do que a do camundongo Swiss, pois esta linhagem de rato é heterogênea.

Os animais isogênicos são sempre mais robustos, com maior fertilidade, maior número de filhotes por ninhada e menos suscetíveis à doenças.

Esterilização pelo calor úmido em autoclave.

Esterilização por gás de óxido de etileno.

Esterilização pelo calor seco em estufa.

Esterilização por radiação ionizante.

Utilização de desinfetantes.

pH

pKa

pKb

[H ⁺ ]

pOH

Grupo de risco 0.

Grupo de risco 1.

Grupo de risco 2.

Grupo de risco 3.

Grupo de risco 4.